【儀表網 行業標準】近日，由 TC76(全國飼料工業標準化技術委員會)歸口，中國農業科學院北京畜牧獸醫研究所 、中國醫學科學院藥用植物研究所 、中國農業科學院飼料研究所 、湖南農業大學 、北京愛綠生物科技有限公司等單位起草的國家標準計劃《飼料添加劑淫羊藿提取物中黃酮醇苷的測定 高效液相色譜法》征求意見稿編制完成，并公開征求意見。截止時間2023年5月27日。
本文件按照GB/T 1.1-2020《標準化工作導則 第1部分：標準化文件的結構和起草規則》的規定起草。
本文件描述了飼料添加劑淫羊藿提取物中黃酮醇苷的高效液相色譜測定方法。本文件適用于飼料添加劑淫羊藿提取物中淫羊藿苷、朝藿定 A、朝藿定 B、朝藿定 C 和寶藿苷 I 的測定。本文件的定量限為 0.2 g/kg。
原理：
試樣中的黃酮醇苷用甲醇溶液提取，高效液相色譜儀測定，外標法定量。
儀器設備：
1.高效液相色譜儀：配有紫外檢測器或二極管陣列檢測器。
2.分析天平：精度 0.1 mg 和 0.01 mg。
3.超聲波清洗機：功率不低于 250 W。
4.離心機：轉速不低于 4 000 r/min。
5.渦旋混勻器。
樣品：
按 GB/T 20195 制備試樣，至少200g，粉碎使其全部通過0.425mm 孔徑的分析篩，充分混勻，裝入密閉容器中，避光保存，備用。
測定：
1.混合標準系列溶液和試樣溶液測定
在儀器的最佳條件下，分別取混合標準系列溶液(5.7)和試樣溶液(8.1)上機測定。淫羊藿苷、朝藿定 A、朝藿定 B、朝藿定 C 和寶藿苷 I 混合標準溶液的高效液相色譜圖見附錄 B。
2.定性
以保留時間定性，試樣溶液中淫羊藿苷、朝藿定 A、朝藿定 B、朝藿定 C 和寶藿苷 I 五種黃酮醇苷的保留時間應與混合標準系列溶液(濃度相當)所對應組分的保留時間一致，其相對偏差在±2.5%之內。
3.定量
以淫羊藿苷、朝藿定 A、朝藿定 B、朝藿定 C 和寶藿苷 I 五種黃酮醇苷的濃度為橫坐標，對應的色譜峰面積為縱坐標，繪制標準曲線，其相關系數應不低于 0.99。試樣溶液中待測物的濃度應在標準曲線的線性范圍內，如超出范圍，用 70%甲醇溶液(5.4)稀釋后重新測定。單點校準定量時，試樣溶液中待測物的濃度與標準溶液濃度相差不超過 30%。
精密度：
在重復性條件下，兩次獨立測定結果與算數平均值的絕對差值不大于該算術平均值的5%。
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