如何對(duì)原代細(xì)胞組分進(jìn)行分級(jí)分離

離心是原代細(xì)胞分級(jí)分離中Z常用的技術(shù)之一，它們單獨(dú)使用，或與其他方法結(jié)合。例如，對(duì)于高爾基體或過氧化物酶體，大部分操作都要求高速的密度梯度離心。然而，O’Hara Noonan也指出，超速離心也有一些缺點(diǎn)，包括超速離心機(jī)是高價(jià)的儀器，有些實(shí)驗(yàn)室無法接觸到。另外，密度梯度難以傾倒是出了名的，其結(jié)果是技術(shù)依賴的。

當(dāng)然，其他的許多組分也可以只利用試劑和臺(tái)式儀器來富集。供應(yīng)商開發(fā)出一些試劑盒，能方便快捷地帶來高度富集的細(xì)胞組分。爾全新設(shè)計(jì)的Mem-PER Plus試劑盒，能在一小時(shí)之內(nèi)富集完整的膜相關(guān)蛋白。

據(jù)sigma-aldrich的產(chǎn)品專家Michael Moehlenbrock介紹，這類試劑盒的原理在很大程度上是類似的。它們往往使用低滲緩沖液給細(xì)胞膜帶來壓力，然后用等滲的提取緩沖液(帶或不帶還原劑和蛋白酶抑制劑)來維持感興趣的細(xì)胞器。有時(shí)也需要機(jī)械裂解或去污劑裂解。“各個(gè)不同供應(yīng)商在細(xì)胞分級(jí)分離試劑盒的設(shè)計(jì)上都是一致的，而不同細(xì)胞組分的差異在于緩沖液組成、裂解試劑和離心速度，”Moehlenbrock說。

此類試劑盒的價(jià)值并不在于某些秘密試劑，而在于QC系統(tǒng)的一致性和重復(fù)性。“細(xì)胞分級(jí)分離的方法已經(jīng)過充分鑒定，其操作步驟適用于大部分應(yīng)用，”Moehlenbrock說。“商業(yè)化試劑盒為Z終用戶帶來了簡(jiǎn)便和效率，同時(shí)提供了*的安全性。”

通過改變穿插在離心步驟之間的緩沖液的去污劑組分，研究人員可分離不止一個(gè)組分。例如，市場(chǎng)上許多試劑盒可收集原代細(xì)胞核和胞漿蛋白。其他試劑盒也帶來了三個(gè)或四個(gè)不同的組分。Cell Signaling Technology的Cell Fractionation Kit產(chǎn)生了細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞膜/細(xì)胞器以及細(xì)胞核/細(xì)胞骨架組分，而QIAGEN的Qproteome Cell Compartment Kit分離出細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞膜、細(xì)胞核和細(xì)胞骨架組分。
中藥對(duì)照藥材    含量：    進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)    甘青青蘭    20mg/支    英文名稱    TLC法鑒別    規(guī)格:
中藥對(duì)照藥材    含量：    進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)    龍膽（龍膽）    20mg/支    英文名稱    TLC法鑒別    規(guī)格:
中藥對(duì)照藥材    含量：    進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)    母丁香    20mg/支    英文名稱    TLC法鑒別    規(guī)格:
中藥對(duì)照藥材    含量：    進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)    蓽澄茄    20mg/支    英文名稱    TLC法鑒別    規(guī)格:
中藥對(duì)照藥材    含量：    進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)    土鱉蟲（地鱉）    20mg/支    英文名稱    TLC法鑒別    規(guī)格:
中藥對(duì)照藥材    含量：    進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)    虎杖葉    20mg/支    英文名稱    TLC法鑒別    規(guī)格:
原代細(xì)胞