為什么要進行細胞株凍存？

細胞株凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術將細胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來，這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞，可以防止因正在培養(yǎng)的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種，起到了細胞保種的作用。

除此之外，還可以利用細胞凍存的形式來購買、寄贈、交換和運送某些細胞。細胞凍存時向培養(yǎng)基中加入保護劑--終濃度5%.15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO)，可使溶液冰點降低，加之在緩慢凍結條件下，細胞內水分透出，減少了冰晶形成，從而避免細胞損傷。 

采用"慢凍快融"的方法能較好地保證細胞存活。標準冷凍速度開始為-1 到 -2℃/min，當溫度低于-25℃時可加速，到-80℃之后可直接投入液氮內(-196℃)。

細胞凍存的步驟

（1）選擇處于對數生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min，10分鐘)。

（2）去上清液，加入含20%小牛血清的*培養(yǎng)基，于4℃預冷15分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為5×106～1×107/mL之間。（凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇，像有些科研君們就用corning胎牛血清,也有人用sigma的小牛血清）

（3）將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中，每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記（日期、細胞種類及代次、凍存支數）。凍存管是長什么樣子的？我們一起

（4）將裝好細胞株的凍存管放到凍存盒中，-80℃冰箱過夜。；如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜，放入液氮罐);或者可以在4℃，2h;然后轉到-20℃，2h;-80℃，2h;放入液氮罐。（凍存盒和程序降溫盒長啥樣。

（5）細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
進口/國產    常溫，避光    規(guī)格:    含量測定    青陽參苷元    20mg
進口/國產    常溫，避光    規(guī)格:        西紅花苷-Ⅱ    20mg
進口/國產    常溫，避光    規(guī)格:    含量測定    重樓皂苷Ⅱ    20nm
進口/國產    常溫，避光    規(guī)格:    含量測定    重樓皂苷Ⅵ    10mg
進口/國產    常溫，避光    規(guī)格:    含量測定    重樓皂苷Ⅶ    10mg
進口/國產    常溫，避光    規(guī)格:    鑒別    總銀杏酸（套）    30mg
進口/國產    常溫，避光    規(guī)格:    含量測定    胡黃連苷-Ⅱ    20mg
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