細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)溫度的需求2017/7/6

維持培養(yǎng)原代細(xì)胞旺盛生長(zhǎng),必須有恒定而適宜的溫度.不同種類的細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)溫度要求也不同.人體細(xì)胞培養(yǎng)的標(biāo)準(zhǔn)溫度為36.5℃±0.5℃,偏離這一溫度范圍,細(xì)胞的正常代謝會(huì)受到影響,甚至死亡....

ATCC細(xì)胞傳代培養(yǎng)的方法2017/7/4

1ATCC細(xì)胞觀察培養(yǎng)基是否正常，細(xì)胞狀態(tài)如何，細(xì)胞密度如何，決定是否傳代。觀察時(shí)擰緊蓋子。2.加熱PBS、versene、培養(yǎng)基，(提前做好)瓶子不要倒著放，不要讓液體接觸到瓶塞。3.打開超凈臺(tái)(先...

細(xì)胞增殖生長(zhǎng)狀態(tài)2017/6/29

人正常組織細(xì)胞初代或傳代培養(yǎng)時(shí)，都有一長(zhǎng)短不同的潛伏期。傳代細(xì)胞系、胚胎組織或幼體組織潛伏期短，一般在第二天即可見細(xì)胞生長(zhǎng)，一周內(nèi)便可連接成片。成體組織的潛伏期長(zhǎng)，老齡組織和癌組織更長(zhǎng)，有時(shí)可達(dá)一周左...

ATCC細(xì)胞傳代標(biāo)準(zhǔn)2017/6/27

ATCC細(xì)胞傳代時(shí)間一般通過兩個(gè)方面進(jìn)行確定：一是在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，當(dāng)培養(yǎng)液由于pH值下降而呈現(xiàn)黃色時(shí)，表明細(xì)胞已經(jīng)達(dá)到Z大密度，需要換液或進(jìn)行傳代培養(yǎng)；二是觀察細(xì)胞形態(tài)，健康細(xì)胞形態(tài)飽滿，折光性好，...

原代細(xì)胞測(cè)定周期的方法2017/6/22

一、原理原代細(xì)胞周期指細(xì)胞一個(gè)世代所經(jīng)歷的時(shí)間。從一次細(xì)胞分裂結(jié)束到下一次分裂結(jié)束為一個(gè)周期。細(xì)胞周期反應(yīng)了細(xì)胞增殖速度。單個(gè)細(xì)胞的周期測(cè)定可采用縮時(shí)攝影的方法，但它不能代表細(xì)胞群體的周期，故現(xiàn)多采用...

分析人正常組織細(xì)胞培養(yǎng)中的試劑2017/6/20

一、人正常組織細(xì)胞的紡錘體阻斷劑（Spindleinhibitor）在有絲分裂過程中，隨著紡錘絲的形成，染色體被牽引到一起難以觀察其形態(tài)。紡錘體的形成在于細(xì)胞質(zhì)和紡錘體成分的粘度之間的平衡，因此，改變...

細(xì)胞培養(yǎng)平底和圓底（U型和V型）培養(yǎng)板的區(qū)別和選擇2017/6/15

ATCC細(xì)胞不同形狀的培養(yǎng)板有不同用途。培養(yǎng)細(xì)胞，通常是選用平底的，這樣便于鏡下觀測(cè)、有明確的底面積、細(xì)胞培養(yǎng)液面高度相對(duì)一致。因此做MTT等實(shí)驗(yàn)時(shí)，無論是貼壁和懸浮細(xì)胞，一般選用平底板。測(cè)吸光值一定...

單核細(xì)胞的用途分析2017/6/13

人正常組織細(xì)胞能吞噬異物產(chǎn)生抗體，在機(jī)體損傷治愈、抗御病原的入侵和對(duì)疾病的免疫方面起著重要的作用。機(jī)體發(fā)生炎癥或其他疾病都可引起單核細(xì)胞總數(shù)百分比發(fā)生變化，因此檢查單核細(xì)胞計(jì)數(shù)成為輔助診斷的一種重要方...

細(xì)胞株培養(yǎng)說明2017/6/8

材料和試劑1.細(xì)胞：貼壁細(xì)胞株2.試劑：0.25％胰酶、1640培養(yǎng)基（含10％小牛血清）3.儀器和器材：倒置顯微鏡，培養(yǎng)箱、培養(yǎng)瓶、吸管、廢液缸等原理細(xì)胞在培養(yǎng)瓶長(zhǎng)成致密單層后，已基本上飽和，為使細(xì)...

分析細(xì)胞周期同步化2017/6/6

(一)ATCC細(xì)胞自然同步化1.多核體如粘菌只進(jìn)行核分裂，而不發(fā)生胞質(zhì)分裂，形成多核體。數(shù)量眾多的核處于同一細(xì)胞質(zhì)中，進(jìn)行同步化分裂，使細(xì)胞核達(dá)108，體積達(dá)5~6cm。瘧原蟲也具有類似的情況。2.某...

ATCC細(xì)胞如何選擇細(xì)胞培養(yǎng)板2017/6/1

一、ATCC細(xì)胞培養(yǎng)板依底部形狀的不同可分為平底和圓底(U型和V型);培養(yǎng)孔的孔數(shù)有6、12、24、48、96、384孔等;根據(jù)材質(zhì)的不同有Terasaki板和普通細(xì)胞培養(yǎng)板。具體選擇時(shí)根據(jù)培養(yǎng)細(xì)胞的...

測(cè)定細(xì)胞株周期的方法2017/5/25

細(xì)胞株周期指細(xì)胞一個(gè)世代所經(jīng)歷的時(shí)間。從一次細(xì)胞分裂結(jié)束到下一次分裂結(jié)束為一個(gè)周期。細(xì)胞周期反應(yīng)了細(xì)胞增殖速度。單個(gè)細(xì)胞的周期測(cè)定可采用縮時(shí)攝影的方法，但它不能代表細(xì)胞群體的周期，故現(xiàn)多采用其他方法測(cè)...

影響人正常組織細(xì)胞因子檢測(cè)準(zhǔn)確度和特異性的因素分析2017/5/23

影響人正常組織細(xì)胞因子檢測(cè)準(zhǔn)確度和特異性的因素有:(1)抗體:單抗的表位識(shí)別;(2)細(xì)胞因子:多種分子形式，結(jié)合蛋白復(fù)合物、抑制劑和可溶性受體復(fù)合物;(3)血漿基質(zhì):干擾抗體，異嗜性抗體和類風(fēng)濕因子;...

ATCC細(xì)胞污染處理流程2017/5/18

1、ATCC細(xì)胞將污染的培養(yǎng)液倒掉，轉(zhuǎn)燒瓶口，加入10mlPBS，適當(dāng)晃動(dòng)清洗培養(yǎng)瓶，然后倒掉。轉(zhuǎn)燒瓶口。2、繼續(xù)加入10mlPBS，同樣方法晃動(dòng)，清洗培養(yǎng)瓶，然后倒掉。3、繼續(xù)加入5mlPBS，同樣...