【儀表網 儀表標準】根據廣西肥料協會下達的《廣西肥料協會關于下達2022年第二批團體標準項目計劃的通知》精神，由廣西壯族自治區分析測試研究中心提出的《含氨基酸水溶肥料 游離氨基酸的測定—分光光度法》(征求意見稿)標準編寫工作已完成。依據《廣西肥料協會團體標準管理辦法(試行)》有關規定，現向社會公眾公開征求意見。
本標準按照GB/T 1.1—2020《標準化工作導則 第1部分：標準化文件的結構和起草規則》的規定起草。參考GB/T 8170 數值俢約規則與極限數值的表示和判斷；HG/T 2843 化肥產品 化學分析中常用標準滴定溶液、標準溶液、試劑溶液和指示劑溶液；NY/T 887 液體肥料 密度的測定；NY/T 1975 水溶肥中 游離氨基酸含量的測定等規程編制。
本標準規定了水溶肥料中游離氨基酸含量測定的分光光度法的試驗方法。本標準適用于液體或固體水溶肥料中游離氨基酸含量的測定。
方法原理：
試樣用活性炭吸附蛋白質和消除色素干擾，用EDTA絡合金屬元素釋放氨基酸，氨基酸與茚三酮反應成藍色物質，在一定濃度范圍內，藍色溶液的吸光度與氨基酸量成正比例關系，用分光光度法測定出總的氨基酸含量，然后再除以矯正系數，最終得到游離氨基酸含量。
儀器：
1.通常實驗室儀器。2.紫外可見分光光度計。3.具塞比色管:10mL。4.玻璃比色皿：1cm。
試樣的制備：
固體樣品經多次縮分后，取出約100g，將其迅速研磨至全部通過0.50mm孔徑篩(如樣品潮濕，可通過1.00mm篩子)，混合均勻，置于潔凈、干燥容器中。液體樣品經多次搖動后，迅速取出約200mL，置于潔凈、干燥的容器中。
試樣溶液的制備：
稱取試樣1g～5g(精確到0.001g)，置于250mL容量瓶中，用水充分溶解后定容到刻度，搖勻后干過濾，棄去20mL初濾液。取約30mL濾液于小燒杯中，加入一勺(約2g)活性炭攪拌2min，靜置5min后干過濾，再用0.45微米的微孔濾膜過濾濾液。準確移取0.50mL濾液于50mL容量瓶中，加入1.0mL EDTA-Na溶液和1.0mL鹽酸溶液，用乙酸-乙酸鈉緩沖溶液定容，搖勻后干過濾，濾液備用待測。
標準曲線的繪制：
空白溶液的制備：用移液管依次吸取2.00mL蒸餾水、1.00mL茚三酮溶液、0.50mL抗壞血酸溶液、1.50mL乙酸-乙酸鈉緩沖溶液于具塞比色管中，在100℃的沸水中加熱15min，取出冷卻至室溫，搖勻。
標準曲線的繪制：用移液管吸取1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL氨基酸標準溶液分別置于4個50mL容量瓶中，用10%異丙醇溶液定容，搖勻。分別用移液管依次吸取2.00mL上述溶液、1.00mL茚三酮溶液、0.50mL抗壞血酸溶、1.50 mL乙酸-乙酸鈉緩沖溶液于具塞比色管中，在100℃的沸水中加熱15min，取出冷卻至室溫，搖勻。以空白溶液為參比，于波長573nm出測定各吸光度。以氨基酸標準溶液的濃度為縱坐標，吸光度為橫坐標繪制標準曲線。
樣品的測定：
分別用移液管依次吸取2.00mL試樣溶液、1.00mL茚三酮溶液、0.50mL抗壞血酸溶液、1.50mL乙酸-乙酸鈉緩沖溶液于具塞比色管中，在100℃的沸水中加熱15min，取出冷卻至室溫，搖勻。以空白溶液為參比，于波長573nm處測定樣品溶液吸光度，在標準曲線上查得相應的游離氨基酸質量。
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