原代細胞凍存法之真空冷凍干燥法

將原代細胞冷凍，在減壓下利用升華作用除去水分，使細胞的生理活動趨于停止，從而長期維持存活狀態。
操作步驟如下：
好氧菌冷凍干燥管的制備
1 安瓿管準備
安瓿管材料以中性玻璃為宜。清洗安瓿管時，先用2%鹽酸浸泡過夜，自來水沖洗干凈后，用蒸餾水浸泡至pH中性，干燥后、貼上標簽，標上菌號及時間，加入脫脂棉塞后，121℃下高壓滅菌15-20分鐘，備用。
2 保護劑的選擇和準備
保護劑種類要根據微生物類別選擇。配制保護劑時，應注意其濃度及pH值，以及滅菌方法。如血清，可用過濾滅菌；牛奶要先脫脂，用離心方法去除上層油脂，一般在100℃間歇煮沸2-3次，每次10-30分鐘，備用。
3 凍干樣品的準備
在Z適宜的培養條件下將細胞培養至靜止期或成熟期，進行純度檢查后（參見科技部自然科技資源平臺聯合管理辦公室文件《微生物菌種純度檢測技術規程》（試行）），與保護劑混合均勻，分裝。微生物培養物濃度以細胞或孢子不少于108-1010個/ml為宜（以大腸桿菌為例，為了取得每毫升1010個活細胞菌液2毫升-2.5毫升，只需10毫升瓊脂斜面兩支）。采用較長的毛細滴管，直接滴入安瓿管底部，注意不要濺污上部管壁，每管分裝量約0.1-0.2毫升，若是球形安瓿管，裝量為半個球部。若是液體培養的微生物，應離心去除培養基，然后將培養物與保護劑混勻，原代細胞再分裝于安瓿管中。分裝安瓿管時間盡量要短，在1-2小時內分裝完畢并預凍。分裝時應注意在無菌條件下操作。
69-72-7         水楊酸片標準品    30tables
302-79-4         維A酸標準品    30mg×5vials
67-97-0    Cholecalciferol (Vitamin D3)    維生素D3標準品    30mg×mpules
50-14-6    Ergocalciferol (Vitamin D2)    骨化醇標準品    30mg×mpules
67-96-9    Dihydrotachysterol    雙氫速甾醇標準品    30mg×4amplues
28910-89-6    Alprazolam Related Compound A    阿普唑侖相關物質A標準品    30mg
520-36-5    Apigenin    芹菜素標準品    30mg
578-74-5    Apigenin-7-glucoside    芹菜苷元-7-葡萄糖標準品    30mg
原代細胞