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    elisa免疫檢測試劑盒實驗操作注意事項

    時間:2017/5/25閱讀:311
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    1. elisa免疫檢測試劑盒正式試驗時,應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應作一式二份,以保證實驗結果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
    2. 在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
    (1) 固相載體的選擇:許多物質可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據此判明其吸附性能是否良好。
    (2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質包被的Z適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值Z大而蛋白量Z少的濃度。對于多數蛋白質來說通常為1~10μg/ml。
    (3) 酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法"(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統里準確地滴定其工作濃度。
    (4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應,而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。elisa免疫檢測試劑盒底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。
    人基質金屬蛋白酶7(MMP-7)    規格:    96T/48T    Human Matrix metalloproteinase-7—MMP-7 ELISA kit    原裝、分裝    
    人基質金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISA kit     規格:    96T/48T    Human Matrix metalloproteinase-3—MMP-3 ELISA kit    原裝、分裝    
    人基質金屬蛋白酶2(MMP-2)    規格:    96T/48T    Human Matrix metalloproteinase-2—MMP-2 ELISA kit    原裝、分裝    
    人基質金屬蛋白酶13(MMP-13)    規格:    96T/48T    Human Matrix metalloproteinase-13—MMP-13 ELISA kit    原裝、分裝    
    人基質金屬蛋白酶10(MMP-10)    規格:    96T/48T    Human Matrix metalloproteinase-10—MMP-10 ELISA kit    原裝、分裝    
    人基質金屬蛋白酶1(MMP-1)    規格:    96T/48T    Human MMP-1——Matrix metalloproteinase-1 ELISA kit    原裝、分裝    
    人巨噬細胞炎性蛋白-3β( MIP-3β)    規格:    96T/48T    Human Macrophage Inflammatory Protein-3β,MIP-3β ELISA kit    原裝、分裝    
    人巨噬細胞炎性蛋白-3α(MIP-3α)    規格:    96T/48T    Human Macrophage Inflammatory Protein-3α,MIP-3α ELISA kit    原裝、分裝    
    人巨噬細胞炎性蛋白-1β (MIP-1β)    規格:    96T/48T    Human Macrophage Inflammatory Protein-1β,MIP-1β ELISA kit    原裝、分裝    
    人巨噬細胞炎性蛋白-1α ( MIP-1α)    規格:    96T/48T    Human Macrophage Inflammatory Protein-1α,MIP-1α ELISA kit    原裝、分裝    
    人巨噬細胞來源的趨化因子(MDC)    規格:    96T/48T    Human Macrophage-Derived Chemokine,MDC ELISA KIT    原裝、分裝    
    人巨噬細胞克隆刺激因子(M-CSF)    規格:    96T/48T    Human Macrophage Colony-Stimulating Factor,M-CSF ELISA kit    原裝、分裝    
    人單核細胞趨化蛋白-3(MCP-3)    規格:    96T/48T    Human Monocyte chemotactic protein-3,MCP-3 ELISA kit    原裝、分裝    
    人單核細胞趨化蛋白-2(MCP-2)    規格:    96T/48T    Human Monocyte chemotactic protein-2,MCP-2 ELISA kit    elisa免疫檢測試劑盒原裝、分裝    

     

     

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