【儀表網 行業標準】由中國材料與試驗標準化委員會科學試驗標準化領域委員會科學試驗裝置標準化技術委員會(CSTM/FC98/TCO3)歸口承擔的《水質急性毒性現場快速監測發光細菌法》團體標準(立項號:CSTM LX 980301433—2024)已完成征求意見稿，按照《中關村材料試驗技術聯盟團體標準管理辦法》的有關規定，現公開廣泛征求意見。
本文件參照GB/T 1.1—2020 《標準化工作導則 第1部分：標準化文件的結構和起草規則》和GB/T 20001.4—2015《標準編寫規則 第 4 部分：試驗方法標準》的規定起草。
本文件規定了測定水質急性毒性現場快速監測的發光細菌法。本文件適用于地表水、地下水、工業廢水和生活污水中發光細菌法急性毒性的現場快速監測。
原理：
樣品中受試物質與發光細菌接觸一定的時間后，可影響或干擾細菌的新陳代謝，使細菌的發光強度下降，受試物質對發光強度的抑制程度與其毒性及濃度有對應關系，發光強度的變化可以用毒性測定儀檢測，根據加入樣品中的發光細菌發光強度與對照發光強度的比值計算樣品的發光抑制率，用發光抑制率表征急性毒性。
干擾和消除：
1.渾濁溶液會導致測試結果偏高，應通過離心或者過濾去除干擾，渾濁度大于100NTU 的樣品應靜置沉淀1小時后待測。
2.pH 值過高或過低都會降低發光細菌的活性，待測樣品的 pH值應在6.0~9.0。若須測定排除 pH值影響的急性毒性，參照8.2調節。
3.經加氯消毒處理的生活污水，加入最終濃度為0.8mg/L 的硫代硫酸鈉以去除殘余氯。
4.高鹽度樣品應調節測試過程中氯化鈉的加入量，使待測樣品不超過相當于30g/L氯化鈉的滲透壓。
5.本方法不能排除色度影響的干擾。
儀器設備：
1.采樣瓶：聚乙烯、聚四氟乙烯或玻璃瓶，帶聚四氟乙烯襯墊瓶蓋。
2.毒性測定儀。具有國標方法測試模式或 ISO 方法測試模式，具備 1 個或多個測試管，可測光譜范圍：300～600 nm，暗計數：≤300 個/s，接觸時間：15 min，毒性范圍：0～100%(發光抑制率)，環境溫度：5～30 ℃。
3.檢測管(與毒性測定儀可配套使用)。
4.精密移液器：100μL、200μL、1000μL和5000μL。
5.電子天平：最小分度值為0.1mg。
6.pH試紙。
7.100mL量筒。
8.100mL容量瓶。
9.1000mL容量瓶。
10.一般常用儀器和設備。
國標方法測試模式：
據不同毒性測定儀規格，按照說明書設定儀器，使其適用于國標方法測試模式。
a)打開毒性測定儀電源，靜置，等待儀器預熱完成。
b)在檢測管中加入200μL 氯化鈉溶液(6.3)，再加入 1800 μL 參比水(6.2)或水樣，充分混勻，參比水作為對照組。
c)取50μL 菌種懸浮液(6.1)依次加入到步驟 b)的檢測管中，輕微搖晃后，迅速放置于儀器對應檢測孔位。
d)待反應15min 后，依次讀取對照組和水樣檢測管的發光強度
ISO 方法測試模式：
根據不同毒性測定儀規格，按照說明書設定儀器，使其適用于 ISO 方法測試模式。
a)打開毒性測定儀電源，靜置，等待儀器預熱完成。
b)在檢測管中加入100μL 氯化鈉溶液(6.3)，再加入900μL 參比水(6.2)或水樣，充分混勻，參比水作為對照組。
c)另取一組檢測管置于儀器中，取100μL 菌種懸浮液(6.1)加入檢測管中，測試菌種懸浮液的初始發光強度。
d)取 900 μL 步驟 b)調節好氯化鈉濃度的對照組、水樣，加入到步驟 c)的檢測管中，混合均勻。
e) 待反應15min 后，依次讀取對照組和水樣檢測管的發光強度。
廢物處置：
現場實驗中產生的廢液和廢物應集中收集，分類保管，并做好相應標識，依法委托有資質的單位進行處理。
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