1、試劑配制及保存
緩沖液：取1包緩沖劑加1000mL蒸餾水或純凈水，攪拌溶解制成磷酸緩沖液，室溫保存。
顯色劑：取1瓶顯色劑加25mL緩沖液溶解，使用時取50μL，4℃冰箱保存。
底 物：取1瓶底物加10mL蒸餾水或純凈水溶解，使用時取50μL，4℃冰箱保存。
酯酶：酶制劑（丁酰酯酶）無需配制，直接取用50μL，4℃冰箱保存。
2、樣品提取
取2g果蔬樣品（塊莖類取4g）剪成1cm左右見方碎片，放入小燒杯（或取樣瓶）中；加入20mL緩沖液，振蕩1~2min，倒出提取液，靜置2min待測。
3、測試
對照測試：于專用反應瓶中加入3mL緩沖液，再分別加入50μL顯色劑和酶液，混勻，37℃下放置30 min后加入50μL底物，搖勻并立即倒入比色杯中，放入測試通道，按儀器“對照”鍵測試3min的吸光度變化值ΔΑ0 .
樣品測試：于專用反應瓶中加入3mL待測樣品液，再分別加入50μL顯色劑和酶液，混勻，37℃下放置30 min后加入50μL底物，搖勻并立即倒入比色杯中，放入測試通道，按儀器“樣品”鍵，測試3min的吸光度變化值ΔΑt .
結果判定：
◇ 以分光光度計測試時，按以下表達式計算出抑制率：
抑制率(%)=[(ΔΑ0－ΔΑt )/ΔΑ0]×100
◇ 以農殘檢測儀檢測時其抑制率一般可自動計算。若樣品抑制率≥70%，表示被測果蔬農殘超標，為陽性結果。陽性結果的樣品需做2次以上重復檢測，多次檢測仍呈陽性需用氣相色譜等儀器做進一步確認。
操作提示：在加底物的環節中，可預先將底物加入比色杯，待靜置時間一到，馬上將反應瓶中的反應液倒入已經加有底物的比色杯，并迅速放入測試通道進行測試。這樣可以減少同時檢測多個樣品時因加底物時間過長而造成的誤差。
4、注意事項
酶活性要求：本試劑盒中酶試劑正常活性ΔA0=0.4~0.8，符合NY/T 448-2001方法的要求。
保存：試劑盒應保存于4℃冰箱，保質期12個月。
使用：任何試劑使用時，用一瓶打開一瓶，用完后才使用新的，防止變質。
器具專用原則：任何用于移液的器具和容器都應各自貼上標簽，單獨使用，以免交叉污染。
試劑只出不入原則：測試時，從任何試劑瓶吸出的試劑，禁止再次注射回試劑瓶。
環境溫度對測試的影響：當環境溫度過低時（一般低于20℃），測試時需作必要保溫措施。
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