收到凍存細(xì)胞的處理方法：
1.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基；
2.從液氮中取出細(xì)胞迅速放入37°C水浴快速解凍（解凍后不要繼續(xù)暖細(xì)胞）；
3.在超凈臺(tái)中加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，1000rpm離心5min；
4.棄上清，加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中，輕輕晃勻；
5.置于37°C，5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒(méi)有透氣孔的話，瓶蓋不要擰太緊)；
6.第二天，用新鮮的培養(yǎng)基給細(xì)胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。
描述：(1)公司可提供新鮮或凍存細(xì)胞株；(2)細(xì)胞株數(shù)量約 5×105/瓶；(3)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說(shuō)明書(shū)及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮細(xì)胞株，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。
產(chǎn)品名稱 | hFoB1.19:SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞直銷 |
規(guī)格 | T25m2 |
貨號(hào) | CS-963226 |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
注意事項(xiàng)：
1.接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色
，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的）。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。
1000669-72-6 KW 2449 10mg Herba lycopodii伸筋草探針?lè)?/span>PCR鑒定試劑盒
1000669-72-6 KW 2449 10mM(in1mLDMSO) Herba lycopodii伸筋草探針?lè)?/span>PCR鑒定試劑盒
1000669-72-6 KW 2449 50mg Moschus麝香探針?lè)?/span>PCR鑒定試劑盒
1000669-72-6 KW 2449 200mg Moschus麝香探針?lè)?/span>PCR鑒定試劑盒
1000672-89-8 (E)-2-(2-Chlorostyryl)-3,5,6-trimethylpyrazine 1mg Fructus cnidii蛇床子探針?lè)?/span>PCR鑒定試劑盒
22-Dehydroclerosteryl acetate 28594-00-5 中文名： 分子式：C31H48O2 度：93.0% 關(guān)鍵詞： 大葉桂櫻; 豆甾烷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù) 小鼠琥珀酸脫氫酶elisa試劑盒 小鼠琥珀酸脫氫酶試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 小鼠琥珀酸脫氫酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠琥珀酸脫氫酶試劑盒、小鼠琥珀酸脫氫酶eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
22-Dehydroclerosterol glucoside 143815-99-0 中文名： 分子式：C35H56O6 度：% 關(guān)鍵詞： 抗肝毒; 豆甾烷; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù) 大鼠凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原elisa試劑盒 大鼠凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 大鼠凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：大鼠凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原試劑盒、大鼠凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
22-Dehydroclerosterol 26315-07-1 中文名：22-去氫赤桐甾醇 分子式：C29H46O 度：94.0% 關(guān)鍵詞： 抗菌; 豆甾烷; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù) 大鼠凝血酶抗凝血酶復(fù)合物elisa試劑盒 大鼠凝血酶抗凝血酶復(fù)合物試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 大鼠凝血酶抗凝血酶復(fù)合物試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：大鼠凝血酶抗凝血酶復(fù)合物試劑盒、大鼠凝血酶抗凝血酶復(fù)合物eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
21-Deoxyneridienone B 924910-83-8 中文名： 分子式：C21H28O3 度：% 關(guān)鍵詞： 孕甾烷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù) 大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體elisa試劑盒 大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體試劑盒、大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
20-Hydroxyecdysone 5289-74-7 中文名：20-羥基蛻皮甾酮 分子式：C27H44O7 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 抗炎; 抗心律失常; 抗?jié)?/span>; 蛻皮甾; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù) 小鼠呼腸孤病毒3型抗體（RV-3Ab）ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
hFoB1.19:SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞直銷10219-69-9 13(R)-HODE 50μg Semen sojae preparatum淡豆豉染料法PCR鑒定試劑盒
102212-26-0 ARN2966 100mg Herba cirsii japonici大薊染料法PCR鑒定試劑盒
102212-26-0 ARN2966 10mg Folium isatidis 大青葉染料法PCR鑒定試劑盒
102212-26-0 ARN2966 50mg Folium isatidis 大青葉染料法PCR鑒定試劑盒
102212-26-0 ARN2966 5mg Fructus jujubae大棗染料法PCR鑒定試劑盒
