描述：(1)公司可提供新鮮或凍存細胞株；(2)細胞株數(shù)量約 5×105/瓶；(3)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細胞密度。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮細胞株，客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。
| 產(chǎn)品名 | 22RV1前列腺癌細胞價格 |
| 規(guī)格 | T25m2 |
| 貨號 | CS-963210 |
收到凍存細胞的處理方法：
1.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基；
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍（解凍后不要繼續(xù)暖細胞）；
3.在超凈臺中加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞，1000rpm離心5min；
4.棄上清，加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中，輕輕晃勻；
5.置于37°C，5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話，瓶蓋不要擰太緊)；
6.第二天，用新鮮的培養(yǎng)基給細胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
iFABP(Human intestinal fatty acid binding protein) ELISA Kit 人腸脂肪酸結(jié)合蛋白 96T
OxLDL(Human oxidized lowdensity lipoprotein) ELISA Kit 人氧化低密度脂蛋白 96T
MPIF-1/CCL23(Human Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 1) ELISA Kit 人骨髓抑制因子
Anti-Dnmt3β DNA甲基轉(zhuǎn)移酶-3β抗體 0.1ml
Anti-DPPA2 多能發(fā)育相關(guān)基因2抗體 0.2ml
Anti-DR3/TNF-αR/TRAMP TNF-α膜受體抗體/DR3 死亡受體3抗體 0.1ml
Anti-DR4/APO2/TRAILR1 死亡受體4抗體 0.1ml
Anti-DTNBP1 精神分裂癥易感基因抗體 1ml
Anti-DVL1 蓬亂蛋白1抗體 0.2ml
Anti-Dynamin 2 兔抗人鳥苷三磷酸酶－發(fā)動蛋白2抗體 0.1ml
Anti-E2F1 轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體 0.1ml
Anti-E2F2 轉(zhuǎn)錄因子E2F-2抗體 0.1ml
Anti-E7 protein 人乳頭瘤病毒16型E7抗體 0.1ml
Anti-EAAT1/Glast 膠質(zhì)細胞谷氨酸運載蛋白1 抗體 0.1ml
Anti-EBNA-3 EB病毒編碼核蛋白-3抗體 0.1ml
Anti-ECE1 內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1ECE1抗體 0.1ml
Anti-ECG2 食道癌相關(guān)基因抗體 0.1ml
Anti-ECM1 細胞外基質(zhì)蛋白1抗體 0.2ml
Anti-ED-1 外胚層發(fā)育不良抗體 0.1ml
Anti-EGF-R 表皮生長因子受體抗體 0.1ml
Anti-EGFR-ⅤⅢ 表皮生長因子受體-8抗體 0.2ml
Anti-Egr-1 早期反應(yīng)基因-1/應(yīng)急反應(yīng)生長基因1抗體 0.1ml
Anti-Emp1 表皮膜蛋白1抗體 0.2ml
anti-EMAb 抗子宮內(nèi)膜抗體 0.2ml
Anti-Endostatin 內(nèi)皮抑素/內(nèi)皮他丁抗體 0.1ml
Anti-EpCAM 上皮細胞粘附分子/表皮細胞粘附分子抗體 0.2ml
Anti-EPEC-IgG O 大腸埃希桿菌O抗體 0.2ml
Anti-EphA2 R 酪氨酸蛋白激酶受體A2抗體 0.1ml
Anti-EphB2 R 酪氨酸蛋白激酶受體B2抗體 0.1ml
Anti-ER 雌激素受體 0.1ml
Anti-ERAB 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Aβ相關(guān)結(jié)合蛋白抗體 0.2ml
1 96T
ADP(Human adiponectin) ELISA Kit 人脂聯(lián)素 96T
HIS(Human Histamine) ELISA KIT 人組胺 96T
Human Resistin ELISA KIT 人抵抗素 96T
ALP-B(Human Bone-specific Alkphase B) ELISA Kit 人骨特異性堿性磷酸酶B 96T
OT/BGP(Human Osteocalcin/Bone gla protein) ELISA kit 人骨鈣素/骨谷氨酸蛋白 96T
sRANKL(Human soluble receptor activator of nuclear factor-kB ligand) ELISA Kit 人可溶性核因子κB受體活化因子配基 96T
1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3(Human 1,25-dihydroxyvitamin D3) ELISA Kit 人1,25二羥基維生素D3 96T
Human histon-H2b ELISA Kit 人組蛋白H2b 96T
OPG(Human Osteoprotegerin) ELISA KIT 人骨保護素 96T
BMPR- II (Human Bone morphogenetic protein receptor II ) ELISA Kit 人骨成型蛋白受體Ⅱ 96T
BMPR-1A(Human Bone morphogenetic protein receptor 1A) ELISA Kit 人骨成型蛋白受體1A 96T
BMP-4(Human Bone morphogenetic protein 4) ELISA Ki 人骨成型蛋白4 96T
BMP-2(Human Bone morphogenetic protein 2) ELISA Kit 人骨成型蛋白2 96T
cAMP(Human cyclic adenosine monophosphate) ELISA Kit 人環(huán)磷酸腺苷 96T
MASP(Human mannan binding lectin associated serine protease) ELISA Kit 人甘露聚糖結(jié)合凝集素相關(guān)絲氨酸蛋白酶 96T
CDK-7(Human Cyclin-dependent kinase 7) ELISA Kit 人周期素依賴性激酶7 96T
CDK-2(Human Cyclin-dependent kinase 2) ELISA Kit 人周期素依賴性激酶2 96T
CDK-1(Human Cyclin-dependent kinase 1) ELISA Kit 人周期素依賴性激酶1 96T
AMPK(Human Phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase) ELISA kit 人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶 96T
LDH(Human Lactate Dehydrogenase) ELISA Kit 人乳酸脫氫酶 96T
ADAM9(Human A Disintegrin And Metalloprotease 9) ELISA Kit 人解整合素樣金屬蛋白酶9 96T
BACE2(Human beta-site APP-cleaving enzyme 2) ELISA Kit 人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2 96T
UPP1(Human uridine phosphorylase 1) ELISA Kit 人尿嘧啶核苷磷酸化酶1 96T
22RV1前列腺癌細胞價格ADH(Human alcohol dehydrogenase) ELISA Kit 人乙醇脫氫酶 96T
RND1(Human Rho family GTPase 1) ELISA Kit 人Rho家族GTP酶1 96T
RIPK2(Human receptor TNFRSF-interacting serine-threonine kinase 2) ELISA Kit 人受體TNFRSF結(jié)合絲氨酸蘇氨酸激酶2 96T
注意事項：
1.接收到細胞，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色
，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。
