細胞凋亡檢測形態學特征和生化特征

細胞凋亡檢測染色體DNA 以核小體為單位的切割導致細胞不可逆死亡。可以采用Nucleosome ELISA，對產生的單體及寡聚核DNA *段進行定量。核小體的DNA 成分被捕獲于酶標板上，使用*標記的抗組蛋白抗體檢測捕獲的核小體數量。組蛋白-DNA *段的量反應了一個特定樣品中死亡及瀕臨死亡的細胞的量。

    DNA *段也可通過片段末端標記進行原位檢測，DNA *段末端標記可通過熒光染料或比色底物方法進行檢測。另外，細胞形態的變化如胞膜皺摺或出泡、核染色質致密、胞質濃縮等，都可作為細胞凋亡的證據。采用熒光染料進行末端標記的可用流式細胞技術進行定量，其光散射變化也可支持由單一參數得出的結論。DNA *段可以從凋亡細胞中分離（Suicide TrackTM DNA ladder Isolation Kit, ）并使用瓊脂糖電泳進行分析。約180bp 的多倍寡核小體片段在電泳上呈典型的梯狀條帶，可進一步證實凋亡的存在。若使用Pellet Paint Co-Precipitant，只需室溫操作，兩分鐘即幫助DNA 沉淀更快捷方便。

    線粒體膜電位和膜通透性的變化也是凋亡細胞一個重要特點。可使用Cytochrome c ELISA Kit或Cytochrome c Release Apoptosis Assay Kit試劑盒檢測凋亡細胞線粒體所釋放的*。也可使用Cytosol/Mitochondria Fractionation Kit分離凋亡細胞線粒體，其膜電位可通過MitoCaptureTM Apoptosis Detection Kit檢測。細胞凋亡檢測另一個生化特征是細胞膜內側的磷脂酰*從胞質轉至胞外。膜聯蛋白中的Annexin Ⅴ，是一種磷脂結合蛋白，與磷脂酰*有強親和力。通過使用Annexin Ⅴ-FITC或 Annexin Ⅴ-Biotin ,Apoptosis Detection Kit ，及RAPIDTM 方法進行凋亡細胞早期檢測。可使用流式細胞儀或熒光顯微鏡監測。同時使用PI，根據細胞膜的通透性區分早期凋亡細胞和壞死細胞。

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細胞凋亡檢測