摩氏摩根菌探針法熒光定量PCR試劑盒 返回列表頁

參數規格：

摩氏摩根菌探針法熒光定量PCR試劑盒運輸及保存：低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。使用本試劑盒提供的陽性對照時，由于其濃度較高，一定要注意不要污染其他試劑和成分。在專門的區域操作。

原理:
盒所謂實時熒光定量PCR技術，是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，產品僅用于科研Z后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。
檢測方法
1.SYBRGreenⅠ法：
在PCR反應體系中，加入過量SYBR熒光染料，SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后，發射熒光信號，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發射任何熒光信號，從而保證熒光信號的增加與PCR產物的增加*同步。
SYBR定量PCR擴增熒光曲線圖
PCR產物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法：
探針完整時，報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收；PCR擴增時，Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解，使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離，從而熒光監測系統可接收到熒光信號，即每擴增一條DNA鏈，就有一個熒光分子形成，實現了熒光信號的累積與PCR產物的形成*同步。
特點優勢：
    1.   特異性：所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過TIANDZ及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到。
    2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為。
    3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
    4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
 5.   優勢1：序列資源豐富，除TIANDZ公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
    6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預培養按照樣品的采集與預培養按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取發病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原，本產品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DN段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

標準品  英文名稱：Trichlorfon  :52-68-6

三正丁基氧化磷標準品  英文名稱：Tributyl Phosphine Oxide  :814-29-9

檸檬三丁酯標準品  英文名稱：Tributyl Citrate   :77-94-1

三喋啶標準品  英文名稱：Triamterene   :396-01-0

己曲安德標準品  英文名稱：Triamcinolone Hexacetonide  :5611-51-8

曲安西龍雙醋酯標準品  英文名稱：Triamcinolone Diacetate   :67-78-7

曲安德標準品  英文名稱：Triamcinolone Acetonide  :76-25-5

曲安西龍標準品  英文名稱：Triamcinolone   :124-94-7

三醋精標準品  英文名稱：Triacetin   :102-76-1

孕三烯標準品  英文名稱：Trenbolone CIII  :10161-33-8

海藻糖標準品  英文名稱：Trehalose   :6138-23-4

鹽曲唑標準品  英文名稱：Trazodone Hydrochloride   :25332-39-2

反鉑對照品標準品  英文名稱：Transplatin   :14913-33-8

甲環標準品  英文名稱：Tranexamic Acid   :1197-18-8

群多普利標準品  英文名稱：Trandolapril   :87679-37-6

真菌/酵母細胞內氧化應激活性氧（ROS）高質綠色熒光測定試劑盒  進口/國產  規格：20次

真菌/酵母細胞內氧化應激活性氧（ROS）初級綠色熒光測定試劑盒  進口/國產  規格：50次

植物細胞內氧化應激活性氧（ROS）高質熒光測定試劑盒  進口/國產  規格：20次

植物細胞內氧化應激活性氧（ROS）初級熒光測定試劑盒  進口/國產  規格：50次

體液氧化應激活性氧（ROS）高質熒光測定試劑盒  進口/國產  規格：50次

體液氧化應激活性氧（ROS）初級熒光測定試劑盒  進口/國產  規格：50次

活體細胞氧化應激活性氧（ROS）原位染色試劑盒（超氧陰離子）  進口/國產  規格：100次

冰凍切片氧化應激活性氧（ROS）原位染色試劑盒（超氧陰離子）  進口/國產  規格：50次

活體細胞氧化應激活性氧（ROS）原位比色法定量檢測試劑盒（超氧陰離子）  進口/國產  規格：100次

細胞培養液氧化應激活性氧（ROS）比色法定量檢測試劑盒（超氧陰離子）  進口/國產  規格：100次
摩氏摩根菌探針法熒光定量PCR試劑盒4,5-Desisopropylideneopirama　4,5-去亞異丙基托吡酯　規格：美國進口

R-Hydroxyopirama　R-羥基托吡酯　規格：美國進口

S-Hydroxyopirama　S-羥基托吡酯　規格：美國進口

D-ValacyclovirHydrochloride　D-鹽酸伐昔洛韋　規格：美國進口

ValacyclovirImpuriyF　伐昔洛韋雜質F　規格：美國進口

Valacyclovir-d4,Hydrochloride　鹽酸伐昔洛韋-d4　規格：美國進口

Valacyclovirhydrochloridehydra　鹽酸伐昔洛韋水合物　規格：美國進口

17-KeoVecuroniumBromide　17-酮基維庫溴銨　規格：美國進口

3-DesaceylVecuronium　3-去乙酰基維庫溴銨　規格：美國進口

ZeainribosidemixedIsomers　玉米素核苷同分異構體混合物　規格：美國進口

rans-Zeainglucoside　反式玉米素葡萄糖苷　規格：美國進口

cis-Zeain　順式玉米素　規格：美國進口

rans-Zeainhydrochloride　反式-鹽酸玉米素　規格：美國進口

Zileuon-d4　齊留通-d4　規格：美國進口

DesmehylOfloxacinHydrochloride　去甲基鹽酸氧氟沙星　規格：美國進口

熒光定量PCR實驗步驟：
①產品僅用于科研取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。