原代細胞凍存

原代細胞凍存是細胞培養、引種、保種和保證實驗順利進行的重要技術手段。在細胞建株和建系中，及時凍存原始細胞是十分重要的。在雜交瘤單克隆抗體的制備過程中，雜交瘤細胞、每次克隆化得到的亞克隆細胞的凍存保種常常是*的實驗操作。因為在沒有建立一個穩定的細胞系或穩定分泌抗體的細胞系的時候，細胞的培養過程中隨時可能因細胞的污染、分泌抗體能力的喪失或遺傳變異等導致實驗失敗，如果沒有原始細胞的凍存，則因為上述的意外而前功盡棄。
培養液是清亮的，倒置顯微鏡下無雜質，37度孵箱培養2-3天，仍清亮，但出現絮狀雜質，鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物，可看到明顯的菌絲，細胞仍可生長，但時間長之后，細胞的活力狀態變差，
用硫酸銅溶液擦拭CO2孵箱內，再把水盤里也加上飽和量的硫酸銅。或者在培養箱的托盤加入飽和的消毒磷酸氫二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。
CO2孵箱被霉菌污染后，可把所有細胞暫時轉移，采用過氧乙酸擦洗孵箱（包括隔板，箱壁）。并把過氧乙酸放置在孵箱內一個小時，使其蒸汽彌漫。待過氧乙酸的氣味消散后，再移入細胞。孵箱應定期清潔（2月左右），尤其在多雨的季節。
其它培養箱清洗方法是：用84液擦洗－清水擦洗－75%酒精擦洗－紫外燈照。
預防霉菌污染，可在培養基里加3u/ml的兩性霉素或制霉菌素或放線菌素D或雙抗；但細胞一旦污染，很難挽救，制霉菌素或放線菌素D或雙抗都于事無補，建議舍棄該污染細胞。，將環境*消毒，如果所有細胞都污染，可能是系統污染，檢查一下培養基和器材，如果只是個別污染，可能是操作問題，就要注意操作。
原代細胞注意事項     
  1.DMSO 不用高壓滅菌；DMEM不能高溫高壓滅菌，可以過濾除菌。
  2.DMSO要用新的，而且要避光保存。
  3.DMSO：含10%FBS的DMEM=1:9(體積比)。
TLC法鑒別    紅豆蔻    中藥對照藥材    121012-200502        1.0g
TLC法鑒別    麥冬    中藥對照藥材    121013-200506        1.0g
TLC法鑒別    兩面針    中藥對照藥材    121014-200302        1.0g
TLC法鑒別    訶子    中藥對照藥材    121015-200503        0.5g
TLC法鑒別    青蒿    中藥對照藥材    121016-200403        1.5g
TLC法鑒別    苦木    中藥對照藥材    121017-200503        0.5g
TLC法鑒別    苦玄參    中藥對照藥材    121018-200503        1.0g
TLC法鑒別    苦參    中藥對照藥材    121019-200505        1.0g
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