原代細胞被菌種污染后的補救方法

實驗室常見的原代細胞污染通常是細菌以金黃色葡萄球菌和大腸桿菌多見，以及霉菌，黑蛟蟲，支原體和真菌。其中真菌Z難發現污染，也Z難處理，而霉菌和支原體等不是雙抗能解決的。

小編曾經遇到貼壁細胞污染，經病原微生物的老師鑒定是金葡菌污染所致，處理方法和樓主大同小異，但相對簡便，Z后把從ATCC購買的原代細胞救過來了。

小編簡單把自己的操作步驟整理下，分享給大家：

1.倒掉培養液，用火烤瓶口和瓶蓋大約1分鐘

2.用大量的PBS反復沖洗，每次約30ML，重復5次

注意：在用火烤瓶口和瓶蓋（如果是一次性培養瓶 時間不能太長，以免軟化變性）

3.加入5ML雙抗，37度，5分鐘

注意：PBS沖洗兩次

4.加入雙抗2ML，室溫5分鐘

注意：PBS沖洗兩次

5.加入培養液10ml 雙抗2ML 6小時后換液

6.重新加入培養液雙抗濃度隨污染情況調整，連續5-7天

7.對于培養箱需要*全面消毒

8.碘伏消毒作用10分后酒精消毒10分鐘，重復兩次

9.紫外照射一小時

污染的原代細胞因為是原代，根本沒有凍存，上述方法處理后傳到第3代，在后來的激光共聚焦顯微鏡檢測沒有見到細胞形態異常。
供前列地爾    見標示量    前列腺素A1    -20℃，避光    *：    規格:
供前列地爾    見標示量    前列腺素B1    -20℃，避光    *：    規格:
供鮭降鈣素    2mg    N-乙酰-半胱氨酸1-鮭降鈣素    密封，4℃保存    *：    規格:
供醋酸奧曲肽    2mg    脫蘇氨醇8奧曲肽    密封，4℃保存    *：    規格:
    553/380fmol    游離甲狀腺素        *：    規格:
    552/362fmol    游離三碘甲狀腺原氨酸        *：    規格:
效價測定    約2.5g    洋地黃    2-8℃，避光    *：    規格:
效價測定    約30mg    垂體后葉    2-8℃，避光    *：    規格:
效價測定    20mg/支    胰島素（豬）    -20℃，避光    *：    規格:
原代細胞