小鼠胚胎成纖維細胞說明書

小鼠胚胎成纖維細胞生長特性復蘇操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過Z易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
Acc-2(人涎腺腺樣囊性癌細胞)    5×106cells/瓶×2
ACHN(人腎癌細胞)    5×106cells/瓶×2
AGS(人胃腺癌細胞)    5×106cells/瓶×2
Ana-1(小鼠巨噬細胞)    5×106cells/瓶×2
Anglne(人卵巢癌細胞)    5×106cells/瓶×2
AR42J(大鼠胰腺外分泌細胞)    5×106cells/瓶×2
ARPE-19(人視網膜上皮細胞)    5×106cells/瓶×2
AsPC-1(人胰腺癌細胞)    5×106cells/瓶×2
AtT-20(小鼠垂體瘤細胞)    5×106cells/瓶×2
B16(小鼠黑色素瘤細胞)    5×106cells/瓶×2
BEL-7402(人肝癌細胞)    5×106cells/瓶×2