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    培養細胞不貼壁的原因和解決方法

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    培養細胞不貼壁可能原因
    (1)胰蛋白酶消化過度
    (2)支原體污染
    (3)培養瓶瓶底不干凈
    (4)培養液pH值過堿(NaHCO3分解)
    (5)消化液或培養液配制錯誤、過期儲存、儲存不當
    (6)細胞老化(如傳代前細胞已匯合導致失去貼附性)
    (7)接種細胞起始濃度太低或太高
    建議解決方法
    (1)縮短胰蛋白酶消化時間或降低胰蛋白酶濃度。
    (2)分離培養物,檢測支原體。清潔支架和培養箱。如發現支原體污染,丟棄培養物。
    (3)注意刷洗,或換用一次性塑料培養瓶
    (4)使用無菌醋酸溶液調整pH值或充入無菌CO2(將培養液敞口放入培養箱也可)
    (5)重新配置消化液或培養液
    (6)啟用新的保種細胞
    (7)調節接種細胞濃度

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