神經突出相關蛋白Slitrk1抗體的生wu素化標記實驗要點

神經突出相關蛋白Slitrk1抗體的生wu素化標記實驗要點:

1. 新型血小板相關內皮分泌蛋白SCUBE1抗體費用 如在反應混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會抑制標記反應。因此,蛋白質在反應前要對 0.1mol/L碳酸qing鈉緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析;

2.所用的NHSB及待生wu素化蛋白質之間的分子比按蛋白質表面的ε-氨基的密度會有所不同,選擇不當則影響標記的效率,應先用幾個不同的分子比來篩選最適條件;

3.用NHSB量過量也是不利的,抗原的結合位點可能因此被封閉,導致抗體失活;

4.由于抗體的氨基不易接近可能造成生wu素化不足,此時可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等;

5.當游離ε-氨基(賴氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結合位點時,或位于酶的催化位點時,生wu素化會降低或損傷抗體蛋白的結合力或活性;

6.生wu素還可能與不同的功能基團,如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及ben酚基,也可與糖基共價結合;

7.交聯反應后,應充分透析,否則,殘余的生wu素會對生wu素化抗體與親和素的結合產生競爭作用;

8.在細胞的熒光標記實驗中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對某些細胞可導致高本底。

小鼠凋亡相關因子配體(mouse Fas Ligand)

小鼠酸性成纖維生長因子(mouse a-FGF)

小鼠堿性成纖維生長因子(mouse b-FGF/FGF-2)

小鼠Fibronectin（mouse Fibronectin）

小鼠Flt3(mouse Flt3)

小鼠Flt3配體(mouse Flt3 Ligand)

小鼠纖維連結蛋白(mous FN)

小鼠Fractalkine（mouse Fractalkine）

小鼠纖維蛋白原(mouse Fibrinogen)

小鼠Foxp3(mouse Foxp3)

小鼠半乳糖凝集素-9(mouse Galectin-9)

小鼠胃泌素(mouse Gastrin)

小鼠Ghrelin(mouse Ghrelin)

小鼠胰高血糖素樣肽-1(mouse GLP-1)

小鼠胰高血糖素(mouse Glucagon)

小鼠GRO(mouse GRO)

小鼠神經膠質細胞衍化營養因子(mouse GDNF)

小鼠生長因子(mouse GH)

小鼠心肌轉錄因子3(mouse GATA3)

小鼠心肌轉錄因子4(mouse GATA4)

小鼠低氧誘導因子1α(mouse HIF-1α)