交鏈孢霉屬通用探針法熒光PCR檢測試劑盒樣品RNA的抽提

交鏈孢霉屬通用探針法熒光PCR檢測試劑盒樣品RNA的抽提：

①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。

②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。

④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇（75%乙醇用DEPCH2O配制），清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。

2 RNA質(zhì)量檢測

1）紫外吸收法測定

先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋（1:100）后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。

① 濃度測定

A260下讀值為1表示40 g RNA/ml。樣品RNA濃度(g/ml)計(jì)算公式為：A260 ×稀釋倍數(shù)× 40 g/ml。

phospho-APBB1 (Ser175)磷酸化鐵蛋白Fe65抗體

phospho-APBB1 (Ser347)磷酸化鐵蛋白Fe65抗體

phospho-Amyloid Precursor Protein (Thr743)磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體

phospho-Amyloid Precursor Protein (Ser730)磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體

phospho-ATF2 (Ser322)磷酸化活化復(fù)制因子2抗體

phospho-ATF2 (Thr51)磷酸化活化復(fù)制因子2抗體

phospho-APC1 (Ser377)磷酸化細(xì)胞周期末期促進(jìn)復(fù)合蛋白APC1抗體

ASAP1發(fā)育分化增強(qiáng)因子1抗體

phospho-ASAP1 (Tyr782)磷酸化發(fā)育分化增強(qiáng)因子1抗體

AKT3蛋白激酶B3

Girdin肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白Girdin抗體

AKAP2蛋白激酶A2抗體

AT2R2血管緊張素Ⅱ受體2抗體

ASH1LASH1蛋白抗體

AADACL2芳香乙酰胺脫乙酰基酶樣蛋白2抗體

AAMP血管內(nèi)皮細(xì)胞遷移蛋白抗體

AKR1B10醛糖還原酶相關(guān)蛋白質(zhì)抗體

AKR1C2膽汁酸結(jié)合蛋白DDH2抗體

ANGPTL3血管生成素樣蛋白3抗體

Acylglycerol Kinase甘油酯激酶線粒體抗體

phospho-alpha Adducin(Ser726)磷酸化內(nèi)收蛋白a1抗體

ATG16L2自噬體ATG16L2蛋白抗體