病毒糖蛋白抗體的生wu素化標(biāo)記實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)

病毒糖蛋白抗體的生wu素化標(biāo)記實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)：

1.如在反應(yīng)混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會(huì)抑制標(biāo)記反應(yīng)。因此,蛋白質(zhì)在反應(yīng)前要對(duì) 0.1mol/L碳suan氫鈉緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析；

2.所用的NHSB及待生wu素化蛋白質(zhì)之間的分子比按蛋白質(zhì)表面的ε-氨基的密度會(huì)有所不同,選擇不當(dāng)則影響標(biāo)記的效率,應(yīng)先用幾個(gè)不同的分子比來(lái)篩選最適條件；

3.用NHSB量過(guò)量也是不利的,抗原的結(jié)合位點(diǎn)可能因此被封閉,導(dǎo)致抗體失活；

4.由于抗體的氨基不易接近可能造成生wu素化不足,此時(shí)可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等；

5.當(dāng)游離ε-氨基(賴氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結(jié)合位點(diǎn)時(shí),或位于酶的催化位點(diǎn)時(shí),生wu素化會(huì)降低或損傷抗體蛋白的結(jié)合力或活性；

6.生wu素還可能與不同的功能基團(tuán),如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及ben酚基,也可與糖基共價(jià)結(jié)合；

7.交聯(lián)反應(yīng)后,應(yīng)充分透析,否則,殘余的生wu素會(huì)對(duì)生wu素化抗體與親和素的結(jié)合產(chǎn)生競(jìng)爭(zhēng)作用；

8.在細(xì)胞的熒光標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對(duì)某些細(xì)胞可導(dǎo)致高本底。

CREB結(jié)合蛋白抗體

腦蛋白9抗體

絲裂原誘導(dǎo)蛋白2抗體

鋅指蛋白393抗體

組蛋白賴氨酸特異性脫甲基酶1抗體

驅(qū)動(dòng)蛋白樣蛋白1抗體

組蛋白甲基化KMT3B抗體

離子通道蛋白Kv4.3抗體

Killin-p53調(diào)節(jié)復(fù)制抑制蛋白抗體

賴氨酸t(yī)RNA的連接酶抗體

220kDa蛋白激酶D相互作用蛋白抗體

磷酸化220kDa蛋白激酶D相互作用蛋白抗體

基爾曼氏細(xì)小病毒VP1/VP2抗體C端

鉀離子通道蛋白家族KCNQ1抗體

組蛋白H3 K9甲基轉(zhuǎn)移酶抗體

生物鐘KAT13D蛋白抗體

Kelch樣蛋白36抗體

鉀氯離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白KCC4抗體

磷酸化離子通道蛋白Kv1.3抗體

鉀離子通道蛋白家族成員4抗體

電壓門(mén)控性鉀通道蛋白亞基kv5.1抗體

電壓門(mén)控性鉀通道蛋白亞基kv6.1抗體

電壓門(mén)控性鉀通道蛋白亞基KV6.3抗體

磷酸化細(xì)胞內(nèi)流鉀通道蛋白KCNJ1抗體

鈣激活鉀通道蛋白KCNT2抗體

細(xì)胞內(nèi)流鉀通道蛋白Kir5.1抗體