光神霉素A如何抑制原代細胞基因表達？

 原代細胞該研究旨在探討Sp1抑制劑光神霉素A(Mithramycin A)對人肺腺癌A549/DDP細胞 MRP1表達的影響。不同濃度光神霉素A作用A549/DDP細胞48 h后, 采用MTT法檢測細胞存活率, Real time RT-PCR檢測Sp1和MRP1基因表達水平, Western blot檢測Sp1和MRP1蛋白表達水平。結果顯示, 300 nmol/L光神霉素A作用A549/DDP細胞48 h后Sp1和MRP1 mRNA表達水平分別降低 31.22%和85.44%, Sp1和MRP1蛋白表達水平分別降低53.27%和40.42%。提示光神霉素A能夠通過抑制Sp1表達, 從而抑制MRP1表達。

肺癌是常見癌癥之一, 嚴重威脅人類的健康。化學治療是癌癥治療的重要手段, 具有手術和放射治療不可替代的作用。然而肺癌細胞多藥耐藥 (multidrug resistance, MDR)是導致化療失敗的主要原因。多藥耐藥是指腫瘤細胞對多種結構不同、靶位點不同、作用方式不同的抗腫瘤藥物具有抵抗性。多藥耐藥相關蛋白1(multidrug resistance-associated protein 1, MRP1)基因過表達是肺癌細胞產生多藥耐藥的主要機制之一。

對MRP1基因5′-末端區分析表明, 在啟動子近側區的正負調控結構域中, 原代細胞包含轉錄因子Sp1結合序列。因此, 本研究通過觀察光神霉素A(Mithramycin A)作用人肺腺癌A549/DDP細胞對Sp1和MRP1表達的影響, 探討Sp1對MRP1表達的影響, 為逆轉腫瘤細胞多藥耐藥提供新靶點。
普魯士藍    100毫升    RT    進口/國產
普魯蘭酶    1克    2～8℃，避光    *
葡萄糖胰蛋白胨瓊脂    25毫升        *
葡萄糖氧化酶    100克        *
葡萄糖脫氫酶    5克        *
葡萄糖酸亞鐵    100克        進口/國產
葡萄糖酸銅    25克        *
葡萄糖酸鎂    5克    2～8℃    *
葡萄糖酸鉀    100克        *
原代細胞