選擇Z適合的人源細胞增殖檢測方法

人源細胞增殖檢測的應用相當廣泛，不論是測試藥物試劑還是生長因子的效果，不論是評估細胞毒性還是分析細胞活性狀態，您都可能會用到它。細胞增殖檢測一般是檢測分裂中的細胞數量或者細胞群體發生的變化。細胞增殖檢測主要分為四類：DNA合成檢測、代謝活性檢測、細胞增殖相關抗原檢測和ATP濃度檢測。在這些方法中作何選擇，主要取決于您所研究的細胞類型和研究方案。

DNA合成檢測

DNA合成檢測是目前實驗室中檢測細胞增殖zui準確可靠的方式。傳統方法是，將放射性標記的3H-胸腺嘧啶與細胞一同孵育幾小時或者孵育過夜。這樣新增殖細胞的DNA中就會摻入放射性標記，經洗脫后可用閃爍計數器SC檢測。該方法時間耗時長而且還有個明顯的弊端，那就是使用和處理放射性物質既麻煩又不安全。不過，您還可以使用5-溴-2-脫氧尿苷BrdU來進行類似實驗，因為BrdU也同樣可以摻入到新合成的DNA中。不過這樣就需要進行額外的實驗步驟，先孵育特異性BrdU單抗和帶標記的二抗，然后再進行比色法、化學發光檢測或熒光信號檢測等步驟。該方法的好處就是讓您不需要再和放射性物質打交道。BrdU標記很適合免疫組化IHC、免疫細胞化學IC、細胞內ELISA、流式細胞分析和高通量篩選。

代謝活性檢測

檢測細胞群體的代謝活性也可以反映細胞增殖的情況。在細胞增殖過程中乳酸脫氫酶的活性會增加，因此四唑鹽或者Alamar Blue在代謝活躍的細胞環境中會逐漸減少，形成能夠改變培養基顏色的甲臜染料。您可以通過低配置或高配置的分光光度計和酶標儀來讀取含染料培養基的吸光度，從而衡量細胞的代謝活性，檢測細胞增殖的情況。

四種zui常見的四唑鹽是：MTT、XTT、MTS和WST1。MTT在標準的人源細胞培養基中是不溶的，而且其生成的甲臜晶體需要溶解在DMSO或者異丙醇中。因此，MTT主要作為終點檢測方法。其他三種鹽與Alamar Blue一樣，都是可溶且無毒的。它們可以作為連續監控手段來跟蹤細胞增殖的動態改變。其中XTT的效率較低，需要添加額外的因子。而WST1更靈敏有效，與其他鹽相比能夠更快顯色。Alamar Blue的靈敏度也很高，只要微孔板的孔中有100個細胞它就能夠檢測到。四唑鹽和Alamar Blue氧化還原染料能夠用于多種儀器和高通量研究，非常方便。它們適用的檢測儀器包括：標準分光光度計、熒光分光光度計和酶標儀等。
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人源細胞