確定毒性水平和消除細胞株培養污染的實驗步驟

①細胞株在無抗生素的培養基中消化、計數和稀釋細胞，稀釋到常規細胞傳代的濃度。
        ②分散細胞懸液到多孔培養板中，或幾個小培養瓶中。在一個濃度梯度范圍內，把選擇抗生素加入到每一個孔中。例如，兩性霉素B推薦下列濃度，0.25，0.50，1.0，2.0，4.0,8.0 mg/ml。
        ③每天觀測細胞毒性指標，如脫落，出現空泡，匯合度下降和變圓。
        ④確定抗生素毒性水平后，使用低于毒性濃度2-3倍濃度的抗生素的培養液培養細胞2-3代。
        ⑤在無抗生素的培養基中培養細胞一代。
        ⑥重復步驟4。
        ⑦在無抗生素的培養基中培養4-6代，確定污染是否以已被消除。
3.支原體(mycoplasma) 污染的細胞， 是否能以肉眼觀察出異狀？
       不能。除極有經驗之專家外，大多數遭受支原體污染的細胞株，無法以其外觀分辨之。可通過支原體檢測試劑盒進行檢測。
        支原體污染幾乎可影響所有細胞之生長參數，細胞株代謝及研究之任一數據。故進行實驗前，必須確認細胞為mycoplasma-free，實驗結果之數據方有意義。
250    用于飲用水中異生細菌分離培養(ACUMEDIA方法)    R2A Agar    R2A 瓊脂
250    用于飲用水，水源水中總大腸菌群的測定(GB標準)    Lactose Peptone Broth    乳糖蛋白胨培養液    
250    用于飲料中真菌及酵母菌檢測(Acumedia方法)    m-GREEN YEAST and FUNGI BROTH    改良綠色酵母菌和真菌肉湯
250    用于飲料中耐酸細菌的分離培養(ACUMEDIA方法)    ORANGE SERUM AGAR    桔汁瓊脂
10ml*2    用于吲哚（靛基質）試驗配套試劑        Kovacs氏靛基質試劑盒   
100    用于抑制革蘭氏陽性菌的生長    No. 3 Bile Salt     三號膽鹽
250    用于一次性使用衛生用品中溶血性鏈球菌的檢驗    Pick’s Broth Base B    匹克氏肉湯基礎B    
細胞株