NAD激酶（NADK）可見分光光度法檢測試劑盒 返回列表頁

操作步驟:

實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數。

1.        加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。

4.        每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8.       用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。

商品屬性：

商品介紹：

測定意義

NADK（EC 2.7.1.23）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中，是目前所發現的生物體內惟一能夠催化NAD+磷酸化生成NADP+的酶，可催化NAD(H)以ATP或無機多聚磷酸[poly(P)]作為磷酰基供體進行磷酸化反應，生成NADP(H)。因此，NAD激酶在合成NADP(H)以及調節NAD(H)與NADP(H)的平衡上具有重要作用。

測定原理：

NADK催化NAD+磷酸化，生成NADP+；NADP+可被6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原為NADPH；NADPH通過PMS的遞氫作用，還原氧化型噻唑藍（MTT），通過在600 nm下測定MTT的還原速度（吸光值的變化）可反映出NADK活性的大小。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計/酶標儀、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1 mL玻璃比色皿和蒸餾水。

實驗方法學：

選擇抗凝的注意點：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

茜素綠 Dye content 95%(R)-1-Boc-3-羥基吡咯烷  98% Anti-Polyprotein (Hepatitis G Virus)  庚型肝炎病多聚蛋白抗體

燦爛綠 高純級,95%2-(1-基)苯 97%Anti-ZEBRA  人類皰疹病4抗體

鉍試劑Ⅰ 97%喹唑啉 98%Anti-membrane glycoprotein E(VZV)  人水痘帶狀皰疹病gE蛋白抗體

鉍試劑II CP三氟磺酸鈧 98%Anti-HHV8/ORF K2  類皰疹病8抗體

鉍試劑II 98%四氫-2 2-二甲基-4H--4-酮 95%Anti-HHV8/ORF50  人類皰疹病8抗體

考馬斯亮藍G250 AR三(4-溴苯基) 98%Anti-HHV8/ORF50  人類皰疹病8抗體

考馬斯亮藍G250 AR，無蛋白2-甲酰基噻唑 97%Anti-HHV8/ORF50  人類皰疹病8抗體

考馬斯亮藍G250 70%，用于電泳500ml透氣不透液墊片 40mm口徑 配套42mm口徑蓋Anti-HHV8/ORF K2  人類皰疹病8抗體

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酵母DNAout（見關聯產品）

溶壁酶（破壁酶）干粉

蝸牛酶干粉

消解酶（溶細胞酶）干粉

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線狀DNA清除劑

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柱式昆蟲mtDNAout，測序級（停產）

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