活化轉(zhuǎn)錄因子6β抗體 返回列表頁

單克隆抗體：
1.概念：由單個B淋巴細胞進行無性繁殖形成的細胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體。
2.特點：化學(xué)性質(zhì)單一，特異性強，靈敏度高。
3.單克隆抗體的應(yīng)用：
（1）診斷疾病：診斷病毒引起的疾病和用癌細胞抗原制備的單克隆抗體定位診斷。
（2）藥物導(dǎo)向治療：運用藥物與單克隆抗體連接在一起制成
（3）分離和純化抗原分子。

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抗體制備過程：
1.材料與試劑
  a．提取的動物 Ig
  b．弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
  c．青霉素和鏈霉素
  d．實驗動物 兔
  e．其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試，查看免疫效果。
5、如果免疫成功，殺死實驗活體，采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清（無菌采制）
單抗的制備過程：
1.動物免疫：注射特定抗原蛋白
2.分離脾淋巴細胞：與培養(yǎng)好的骨髓瘤細胞混合，人工誘導(dǎo)細胞融合。
3.細胞融合：淋巴細胞雜交瘤的制備
4.雜交瘤細胞的篩選：HAT選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞。（含次黃嘌呤（H）、氨基喋呤（A）及胸腺嘧啶核苷（T）的一種培養(yǎng)基，其中三種成分與細胞DNA合成有關(guān)，骨髓瘤細胞遺傳缺陷型，不能利用，被淘汰）
5.培養(yǎng)雜交瘤細胞：體外培養(yǎng)雜交瘤細胞，從培養(yǎng)液中分離提取單克隆抗體。或者，將雜交瘤細胞移植到小鼠腹腔內(nèi)，從小鼠腹水中分離提取單克隆抗體。
6.單克隆抗體的制備和凍存、純化
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多克隆抗體定制：
當(dāng)機體受到抗原刺激后, 產(chǎn)生免疫學(xué)反應(yīng)，由機體的漿細胞合成并分泌的與抗原有特異性結(jié)合能力的一組球蛋白，這就是免疫球蛋白，這種與抗原有特異性結(jié)合能力的免疫球蛋白就是抗體。 抗體的特異性取決于抗原分子的決定簇,各抗原分子具有許多抗原決定簇。因此,由它免疫動物所產(chǎn)生的抗血清實際上是多種抗體的混合物,稱為多克隆抗體。由于具有可識別多個表位、可引起凝集反應(yīng)、沉淀反應(yīng)等優(yōu)點，產(chǎn)品僅用于科研被廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)診斷領(lǐng)域,。
（1）IgG ：血清中含量，因此是重要的抗感染分子，包括抗菌、抗病毒、抗毒素等。IgG 還能激活補體，結(jié)合并增強巨噬細胞的吞噬功能（調(diào)理作用和 ADCC 效應(yīng)），穿過胎盤，保護胎兒及新生嬰兒免受感染。
（2）IgA ：分單體和雙體兩種。前者存在血清中，后者存在于黏膜表面及分泌液中，是黏膜局部抗感染的重要因素。
（3）IgM ：是分子量大，體內(nèi)受感染后早產(chǎn)生的抗體，具有很強的激活補體和調(diào)理作用，因此是重要的抗感染因子，且常用于診斷早期感染。
（4）IgD ：主要存在于成熟 B 細胞表面，是 B 細胞識別抗原的受體。
（5）IgE ：血清中含量少的抗體，某些過敏性體質(zhì)的人血清中可檢測到，參與介導(dǎo) I 型超敏反應(yīng)和抗寄生蟲感染。
實驗原理 :
（1）特異性結(jié)合抗原：抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞，通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而，抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合，直接發(fā)揮中和病毒的作用。
（2）活補體：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
（3）結(jié)合細胞：不同類別的免疫球蛋白，可結(jié)合不同種的細胞，參與免疫應(yīng)答。
（4）產(chǎn)品僅用于科研可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G（IgG）能通過胎盤進入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A（IgA）可通過消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
（5）具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì)，也具有刺機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
（6）抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì)，均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經(jīng)透析法將其純化。
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