趨化素樣因子超家族成員5抗體 返回列表頁

免疫熒光技術(shù)的實驗步驟：
一、準備好試劑與儀器：
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標本片上，十分鐘后棄去，使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液，使其*覆蓋標本，置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
詳細介紹：

?
抗體的制備過程：
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白，通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析，具有高效，特異性強，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價，而真空干燥保存時間可以更久。產(chǎn)品僅用于科研保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
?
抗體的生活習性：
(1)結(jié)合特異性抗原：抗體與其他免疫球蛋白分子區(qū)別，就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合，在體內(nèi)導致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)。抗體是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補體：抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后，借助暴露的補體結(jié)合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等免疫作用。
(3)結(jié)合細胞：不同類別的免疫球蛋白，可結(jié)合不同種的細胞，產(chǎn)生不同的疚，參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產(chǎn)品僅用于科研具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì)，也具有刺激機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì)，均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經(jīng)透析法將其純化。
DLD antibody54 kDaP09622Human, Mouse資源名稱簇生沿絲菌提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no

DLEC1 antibody80-90 kDa, 46 kDa Q9Y238Human, Mouse 資源名稱毛栓菌（斜面）提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no

DLEU1 antibody27-30kdO43261Human資源名稱煙色離褶傘提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no

DLG1 antibody100 kDaQ12959Human, Mouse, Rat資源名稱干酪菌提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no

DLG3 antibodyQ92796Human, Mouse, Rat資源名稱解纖維素熱厭氧桿菌分離基物:溫泉提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1

DLG5 antibody75kd,105kdQ8TDM6Human, Mouse 資源名稱食砜節(jié)桿菌分離基物:土壤樣品提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1

DLGAP3 antibody106-120kdO95886Human, Mouse 資源名稱類白喉棒桿菌分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no

熱黃擬無枝菌號：59891-1英文名字：alpha-Lactose,monohydrate分子式：C12H24O12分子量：360.31物理性狀及指標：

Amycolatopsisalbidoflavus號：59122-55-3英文名字：Dodecylglucopyranoside分子式：C18H36O6分子量：348.47物理性狀及指標：

巨孢鏈霉菌號：130351-5英文名字：Tetraacetylribose分子式：C13H18O9，分子量：318.28物理性狀及指標：

利迪鏈霉菌號：100307英文名字：Mezitosemonohydrate分子式：C18H32O16·H2O，分子量：522.45物理性狀及指標：

鏈霉菌號：9005-79-2英文名字：Glycogenfromoyster分子式：C24H42O21分子量：666.58物理性狀及指標：
趨化素樣因子超家族成員5抗體雜色曲霉原變種Mouse ANGPTL2 (Angiopoietin Like Protein 2)  Kit 人外周血淋巴細胞

交鏈孢霉Mouse ANGPTL4 (Angiopoietin Like Protein 4)  Kit 大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞

變幻青霉Mouse ANG-R-Tie1 (Angiopoietin Receptor Tie1)  Kit GFP標記的小鼠子細胞

膨大彎頸霉Mouse ANG-R-Tie2 (Angiopoietin Receptor Tie2)  Kit 人肺巨細胞癌高轉(zhuǎn)移系

純黃絲衣霉Mouse AGT (Angiotensinogen)  Kit人白血病細胞系

細極鏈格孢Mouse ANG1 (Angiopoietin 1)  Kit小鼠白血病克隆細胞系

灰色大孢鏈霉菌Mouse ANG2 (Angiopoietin 2)  Kit雜交瘤細胞抗CD2

黃赭色鏈霉菌Mouse ANXA5 (Annexin A5)  Kit人急性B淋巴細胞白血病細胞