非受體性蛋白酪氨酸激酶ETK抗體 返回列表頁

免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟：
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器：
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上，十分鐘后棄去，使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液，使其*覆蓋標(biāo)本，置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標(biāo)本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
詳細(xì)介紹：

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抗體的制備過程：
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白，通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析，具有高效，特異性強(qiáng)，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進(jìn)行保存。抗體一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià)，而真空干燥保存時(shí)間可以更久。產(chǎn)品僅用于科研保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
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抗體的生活習(xí)性：
(1)結(jié)合特異性抗原：抗體與其他免疫球蛋白分子區(qū)別，就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合，在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)。抗體是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補(bǔ)體：抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后，借助暴露的補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)去激活補(bǔ)體系統(tǒng)、激發(fā)補(bǔ)體的溶菌、溶細(xì)胞等免疫作用。
(3)結(jié)合細(xì)胞：不同類別的免疫球蛋白，可結(jié)合不同種的細(xì)胞，產(chǎn)生不同的疚，參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動(dòng)免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產(chǎn)品僅用于科研具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì)，也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì)，均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經(jīng)透析法將其純化。
TC3 aibody66 kDaQ6NUS6Human, Mouse

TDG aibody55-60 kDaQ13569Human, Mouse, Rat

TDO2 aibody48 kDaP48775Human, Mouse, Rat

TDP1 aibody68 kDaQ9NUW8Human, Mouse, Rat

TDP-43 aibody43 kDaQ13148Human, Mouse, Rat, Zebrafish

TDP-43 aibody43 kDaQ13148Human, Mouse, Rat

TDP-43 aibody43 kDaQ13148Human, Mouse, Rat

G蛋白激活內(nèi)向鉀通道5抗體別 名 inwardly rectifying subfamily J member 5; Cardiac ATP sensitive potassium chann; Cardiac inward rectifier; CIR; G protein activated inward rectifier potassium chann 4; G protein-activated inward rectifier potassium chann 4; GIRK 4; GIRK-4; GIRK4; Heart KATP chann; Inward rectifier K(+) chann Kir3.4; Inward rectifier K+ chann KIR3.4; IRK-4; IRK5_HUMAN; KATP 1; KATP-1; KATP1; KCNJ 5; Kcnj5; KIR 3.4; KIR3.4; Potassium chann; Potassium chann inwardly rectifying subfamily J member 5; Potassium inwardly rectifying chann J5; Potassium inwardly rectifying chann subfamily J member 5.

心臟鉀離子通道蛋白亞基2抗體別 名 Cardiac potassium chann subunit; KCNG2; KCNG2_HUMAN; KV6.2; Potassium voltage-gated chann subfamily G member 2; Voltage-gated potassium chann subunit Kv6.2.

Ras信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)KSR1蛋白抗體別 名 BKSR 1; BKSR1; dKsr; EK 31; EK31; hb; Kinase suppressor of ras 1; Kinase suppressor of ras; KSR 1; KSR1; Positive Ras signaling mediator family member; RSU 2; RSU2; SR 31; SR31; Suppressor of activated let 60 Ras SUR3; Suppressor of Ras1 31.
非受體性蛋白酪氨酸激酶ETK抗體Pseudomonas│fluorescens分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no分類、研究，具有處理富營(yíng)養(yǎng)水體和養(yǎng)殖廢水潛力。培養(yǎng)基: 0002生長(zhǎng)條件: 28℃真空冷凍干燥法；礦物油法

Pseudochrobactrum│asaccharolyticum分離基物: 沉積物/表層沉積物提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no潛在的有機(jī)污染物降解/分離自十溴聯(lián)醚富集群培養(yǎng)基: 471生長(zhǎng)條件: 28℃液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Flavobacterium│degerlachei分離基物: 沉積物/深灰色沉積物提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no產(chǎn)酶微生物/產(chǎn)蛋白酶株培養(yǎng)基: 821生長(zhǎng)條件: 15℃液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Escherichia│coli分離基物: 死亡雞提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式株: no用于科研培養(yǎng)基: 335生長(zhǎng)條件: 37真空冷凍干燥法;

Avibirnavirus│Infectious bursal disease virus分離基物: 病雞提供形式: 凍結(jié)物安全等級(jí): 2模式株: no用于科研培養(yǎng)基: 0生長(zhǎng)條件: 37其他;

Escherichia coli DH5α( pUC19)提供形式: 西林瓶，片安全等級(jí): 1模式株: nopUC19質(zhì)粒提取。培養(yǎng)基: LB培養(yǎng)基，含50μg/mL氨芐青霉素鈉。

酵母提取物 5.0 g,蛋白胨 10.0 g,NaCl 10.0 g,瓊脂 15.0 g,蒸餾水 1.0 L,pH 7.0。121℃，15min滅。 滅結(jié)束，冷卻降溫后加入氨芐青霉素鈉，使培養(yǎng)基中氨芐青霉素鈉終含量為50μg/mL。生長(zhǎng)條件: 37℃  ，好氧-20℃避光保存；運(yùn)輸條件：常溫運(yùn)輸。

嗜熱鏈球種屬: Streptococcus│thermophilus提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no巴氏滅典型株。培養(yǎng)基: CM0503生長(zhǎng)條件: 37℃真空冷凍干燥法

Bacillus│safensis分離基物: 生物樣/野生鯔魚腸道內(nèi)容物提供形式: 凍干物模式株: no共生微生物/野生鯔魚腸道共生 產(chǎn)酶微生物/脂酶（三丁酸甘油酯）、蛋白酶、纖維素酶培養(yǎng)基: 33生長(zhǎng)條件: 28℃液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Boletus│edulis Bull.:Fr.分離基物: 子實(shí)體提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式株: no食用培養(yǎng)基: 150生長(zhǎng)條件: 28-30定期移植法