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免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟：
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器：
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上，十分鐘后棄去，使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液，使其*覆蓋標(biāo)本，置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標(biāo)本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
詳細(xì)介紹：

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抗體的制備過程：
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白，通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析，具有高效，特異性強(qiáng)，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進(jìn)行保存?？贵w一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價(jià)，而真空干燥保存時(shí)間可以更久。產(chǎn)品僅用于科研保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
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抗體的生活習(xí)性：
(1)結(jié)合特異性抗原：抗體與其他免疫球蛋白分子區(qū)別，就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合，在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)?？贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補(bǔ)體：抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后，借助暴露的補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)去激活補(bǔ)體系統(tǒng)、激發(fā)補(bǔ)體的溶菌、溶細(xì)胞等免疫作用。
(3)結(jié)合細(xì)胞：不同類別的免疫球蛋白，可結(jié)合不同種的細(xì)胞，產(chǎn)生不同的疚，參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動(dòng)免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產(chǎn)品僅用于科研具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì)，也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì)，均能破壞抗體的作用?？贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上?？捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經(jīng)透析法將其純化。
HBA1/Alpha globin  血紅蛋白α1桑椹4-溴吡啶鹽酸鹽Human PKIα (Protein Kinase Inhibitor Alpha) 檢測試劑盒

hHb  人血紅蛋白單克隆粉萆薢4-溴吡啶鹽酸鹽Human PKIβ (Protein Kinase Inhibitor Beta) 檢測試劑盒

HBsAg  人乙肝表面抗原銀杏葉4-溴吡啶鹽酸鹽Human PKIγ (Protein Kinase Inr Gamma) 檢測試劑盒

HBsAg  人乙型肝炎表面抗原單克?。z測）紫荊皮硫普羅寧Human PG (Proteoglycan) 檢測試劑盒

HBcAg  人乙型肝炎核心抗原單克隆翻白草硫普羅寧Human PTK (Protein Tyrosine Kinase) 檢測試劑盒

HBeAg(1)  人乙肝e抗原（1）巴戟天 L-烯基甘氨酸Human PTPRJ (Protein Tyrosine Phosphatase Receptor Type J) 檢測試劑盒

HBeAg(2)  人乙型肝炎e抗原單克?。?）馬錢子L-烯基甘氨酸Human PP (Protein Phosphatase) 檢測試劑盒

VWCE  VWCE化橘紅5-羥基吲哚Human PPP1R1A (Protein Phosphatase 1 Regulatory Subunit A) 檢測試劑盒

有絲分裂控制樣蛋白DIS3LPorcine CYTIP (Cytohesin Ieracting Protein) 檢測試劑盒

有絲分裂控制蛋白樣DIS3L2Porcine PCDH1 (Protocadherin 1) 檢測試劑盒

DOM3Z蛋白Porcine PARP4 (Poly ADP Ribose Polymerase 4) 檢測試劑盒

蓬亂蛋白2Porcine DEFα1 (Defensin Alpha 1, Neutrophil) 檢測試劑盒

磷酸化蓬亂蛋白2Porcine SAG (S Aigen) 檢測試劑盒

轉(zhuǎn)錄下調(diào)蛋白1Porcine ACO1 (Aconitase 1) 檢測試劑盒

脫氫酶/還原酶家族成員2Porcine CENPH (Ceromere Protein H) 檢測試劑盒

牙本質(zhì)磷蛋白Porcine BSP (Bone Sialoprotein) 檢測試劑盒
12號染色體開放閱讀框29抗體類諾卡氏屬Porcine MCF (Macrophage Chemotatic Factor)  Kit

馬里斯棒狀桿Porcine AGGF1 (Angiogenic Factor with G Patch and FHA Domains 1)  Kit

馬賽Porcine GSTω1 (Glutathione S Transferase Omega 1)  Kit

頭花革Porcine FcγBP (Fc Fragme of IgG Binding Protein)  Kit

枯草芽胞桿Porcine COL7 (Collagen Type VII)  Kit

釀酒酵母Porcine PDGF-BB (Plaet Derived Growth Factor-BB)  Kit

釀酒酵母Porcine TARC (Thymus Activation Regulated Chemokine)  Kit

山茶Porcine FRSF1B (Tumor Necrosis Factor Receptor Superfamily, Member 1B)  Kit