磷酸化β抑制蛋白1抗體 返回列表頁

免疫熒光技術的實驗步驟：
一、準備好試劑與儀器：
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標本片上，十分鐘后棄去，使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液，使其*覆蓋標本，置于有蓋搪瓷盒內，保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
詳細介紹：

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抗體的制備過程：
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白，通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量生產時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進一步的純化，利用偶聯了抗原的親和柱進行層析，具有高效，特異性強，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進行保存?？贵w一般比較穩定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價，而真空干燥保存時間可以更久。產品僅用于科研保存前需經除菌并添加防腐劑。
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抗體的生活習性：
(1)結合特異性抗原：抗體與其他免疫球蛋白分子區別，就在于抗體能與相應抗原發生特異性結合，在體內導致生理或病理效應;在體外產生各種直接或間接的可見的抗原抗體結合反應?？贵w是靠其分子上的特殊的結合部位與抗原結合的。
(2)激活補體：抗體與相應抗原結合后，借助暴露的補體結合點去激活補體系統、激發補體的溶菌、溶細胞等免疫作用。
(3)結合細胞：不同類別的免疫球蛋白，可結合不同種的細胞，產生不同的疚，參與免疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產品僅用于科研具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質，也具有刺激機體產生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質，均能破壞抗體的作用?？贵w可被中性鹽類沉淀。在生產上?？捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經透析法將其純化。
phospho-FSCN1(Ser39)  磷酸化纖維束蛋白同源物1莫諾苷5-氯-2-甲氧基磺酰氯Human SEPCR/PROCR (Soluble Endothelial Protein C Receptor) 檢測試劑盒

PG-C  胃蛋白酶原C(R型)人參皂苷Rg22,4-噻唑烷二酮Human UBA52 (Ubiquitin A 52 Residue Ribosomal Protein Fusion Product 1) 檢測試劑盒

PPARGC1A/PGC-1 Alpha  過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活子1α商陸皂苷甲2,4-噻唑烷二酮Human PON2 (Paraoxonase 2) 檢測試劑盒

PGRN  顆粒蛋白前體白當歸腦2,4-噻唑烷二酮Human NES1 (Nesfatin 1) 檢測試劑盒

Prohibitin  抑制素/腫瘤抑制因子新橙皮苷二氫查爾酮4-異喹啉甲Human PON3 (Paraoxonase 3) 檢測試劑盒

PI3K  磷脂酰肌激酶馬錢苷酸4-異喹啉甲Human DDT (D-Dopachrome Tautomerase) 檢測試劑盒

PI3K p85 (Tyr458)/p55 (Tyr199)  磷酸化磷脂酰肌激酶仙鶴草酚B4-異喹啉甲Human SC5b9 (soluble terminal compleme complex) 檢測試劑盒

PI3KCA/PtdIns 3 kinase p110  磷脂酰肌激酶催化亞單位A升麻-3-O-β-D-吡喃木糖苷GW9662Human UCHL1 (Ubiquitin Carboxyl Terminal Hydrolase L1) 檢測試劑盒

磷酸化接頭蛋白Gab2Monkey ANEA (Ai-Neutrophil Elastase Aibody) 檢測試劑盒

干擾素/維甲酸誘導凋亡相關基因Monkey UBR4 (Ubiquitin Protein Ligase E3 Compone N-Recognin 4) 檢測試劑盒

磷酸化接頭蛋白Gab 2Monkey OLFM4 (Olfactomedin 4) 檢測試劑盒

多肽N-乙酰氨基半乳糖轉移酶13Monkey PAP (Plasmin-Aiplasmin Complex) 檢測試劑盒

銜接蛋白γ/γ1-AdaptinMonkey CTAPIII (Connective Tissue Activating Peptide III) 檢測試劑盒

半乳糖瓦爾登轉化酶Monkey TFF2 (Trefoil Factor 2) 檢測試劑盒

半乳糖凝集素10Monkey HCCS (Holocytochrome C Syhase) 檢測試劑盒

半乳糖激酶2Monkey FGFR4 (Fibroblast Growth Factor Receptor 4) 檢測試劑盒
磷酸化β抑制蛋白1抗體Candida│parapsilosis分離基物: 生物樣/白骨壤/葉提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式株: no近海酵母培養基: 513生長條件: 28℃液氮超低溫凍結法；-80℃冰箱凍結法

嗜酸乳桿種屬: Lactobacillus│acidophilus提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no培養基: 728生長條件: 37℃真空冷凍干燥法

Gordonia│terrae提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no培養基: 794生長條件: 28-30℃真空冷凍干燥法

Monilinia│fructigena Honey分離基物: 自然發病果提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式株: no培養基: 14生長條件: 22－25定期移植法

Fusarium│solani提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式株: no培養基: 0014生長條件: 25-28℃

創傷弧種屬: Vibriovulnificus分離基物: 人的血液，佛羅里達，美國安全等級: 1模式株: yes模式株培養基: 97生長條件: 37℃

Bacillus│pumilus分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no培養基: 831生長條件: 37℃真空冷凍干燥法

Pestalotiopsis│clavispora分離基物: 海蓮枝(內生)提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式株: no培養基: 0014生長條件: 25-28℃液氮超低溫凍結法;礦物油法

Micromonospora│roseopurpurea分離基物: 土壤提供形式: 斜面培養物安全等級: 1模式株: no產生rosamicin（薔薇霉素）培養基: CM0012生長條件: 35-37C真空冷凍干燥