毛莖點霉保存 返回列表頁

儀器設備與器具：
1 恒溫培養(yǎng)箱：36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平：感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿（直徑為90mm）、試管，經121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
規(guī)格參數：
資源名稱  毛莖點霉保存
種屬: Chaetophoma│sp.

分離基物: 葉

提供形式: 斜面培養(yǎng)物

模式菌株: no

應用領域: 蛇足石杉內生真菌研究

培養(yǎng)基: 15

生長條件: 28℃

存儲條件: 定期移植法

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培養(yǎng)方法：
培養(yǎng)基 乳酸菌培養(yǎng)基 Ⅱ：Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐溫) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸鈉) 5g Diamine citrate (檸檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸餾水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃，15min。
傳代方法 ①凍干管：75%酒精擦拭管壁，后用砂輪在凍干管壁劃兩圈，掰斷，用200μL無菌水或培養(yǎng)基充分溶解，平板涂布，活化培養(yǎng)。 ②斜面：試管口用75%酒精擦拭后，火焰灼燒，后用無菌接種鏟切塊，挑取接入平板或斜面，培養(yǎng)。
產品僅用于科研生長條件 30℃，好氧
存儲條件 2-8℃冷藏
低溫存法：
①簡單保存法，將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1～2個月，若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3～4個月；②液氮超低溫保存法，將生長穩(wěn)定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中，密封于安瓿管內，然后控制冷卻速度，使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時，即可置于-150～-196℃的液氮罐中保存。大多數微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物，都可用此法長期保存。
微生物培養(yǎng)方法：
1、平板劃線分離法：把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面，通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細胞，經培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng)，在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。
上述兩種方法雖然都可以實現觀察菌落特征的目的，但平板劃線分離法不能對菌落計數，而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復雜，對平板的要求比較高，可參照以下步驟：
a、制備平板培養(yǎng)基將蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃，向蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3～5ml并混合均勻，然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿，輕輕搖動培養(yǎng)皿，使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部，待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g，放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中，振搖15～20min混合均勻，用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻，制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml，滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置，用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴展，使之分布均勻。
基本概念：
(1)菌群：由多種細菌混合組成的相對穩(wěn)定的細菌群體，產品僅用于科研具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產氣腸細菌及他們之間的過渡類型。
(2) 菌屬：菌種的上一級分類，通常性狀相近、親緣關系密切的若干菌種組成一個菌屬，如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細菌基本的分類單位，通常指表型特征相似、親緣關系接近的一類細菌群體，與同屬內其他種有著明顯差異；當涉及到細菌保存時，菌種是指細菌的種子（用來長期保存）資源。
(4) 菌型：同一菌種的不同細菌，在某些方面存在較小差異的為同一菌型，通常一個菌種內的細菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株：由一個獨立分離的單細胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代，一種微生物的每一個不同來源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個菌株。
Bacteroides fragilis脆弱擬桿菌LAMP試劑盒英文名稱：

產品規(guī)格：20T

發(fā)貨周期：1～3天

保存條件：-20℃冰凍保存。

保存期：一年

操作步驟：

1．樣品處理

(1)玻片預先用多聚賴氨酸或APES 進行處理。

(2)細胞涂片和冰凍切片：重要的是及時固定。用 4%多聚/0.01M PBS(PH7.0---7.6)室溫下固定 30—60分鐘。0.01M PBS洗2分鐘×2次。蒸餾水洗滌 2分鐘×2次。

(3)組織：有條件時應及時固定。常規(guī) 4%多聚/0.01M PBS(PH7.0---7.6)或10%中性緩沖福爾馬林固定4小時以上，石蠟包埋。切片常規(guī)脫蠟入水(脫蠟務必干凈)。

2．標本片加 0.01M TBS 1:200 新鮮稀釋 Proteinase K 37℃消化 1—15分鐘,0.01M TBS洗2分鐘×3次。(細胞涂片和冰凍切片一般不消化或消化 10—60 秒鐘。新鮮石蠟切片消化 5-10分鐘。陳舊石蠟切片消化 10-15分鐘)。

3．標本片加標記緩沖液(Labeling Buffer)20μl/片,以保持切片濕潤。按每張切片取 TdT和DIG-d-UTP 各1μl，加入18μl標記緩沖液中，混勻。甩去切片上多余液體后加標記液，20μl/片。置樣品于濕盒中，37℃標記2小時。

4．0.01M TBS洗2分鐘×3次。

5．加封閉液 50μl/片，室溫30分鐘，甩掉封閉液，不洗。

6．用抗體稀釋液 1：100 稀釋生物素化抗抗體：(取 1ml 抗體稀釋液加生物素化抗抗體10μl)，混勻后 50μl/片加至標本片上。置樣品于濕盒中，37℃反應30分鐘。0.01M TBS洗2分鐘×3次。

7．用抗體稀釋液 1：100 稀釋 SABC-FITC/(SABC-POD)：取 1ml 抗體稀釋液加 SABC-FITC/(SABC-POD 10μl，混勻后 50μl/片加至切片。37℃反應30分鐘。0.01M TBS洗5分鐘×4次。

8．加 SABC-FITC的在熒光顯微鏡下用藍色光激發(fā)觀察。

9．加 SABC-POD的，可選用 DAB 顯色：取 1ml 蒸餾水，分別加入 DAB 試劑盒中 A，B，C 試劑各一滴，混勻后加至標本片上，顯色 10-30分鐘左右。水洗。

10．蘇木素輕度復染。0.01M TBS洗，蒸餾水洗。水溶性封片劑封片。
甲醇/二氯(1:1)中?溶液　2ml　Adevirus(AV)腺病毒E型探針法熒光定量PCR試劑盒

甲醇中萘溶液　1.2mL　Adevirus(AV)腺病毒F型PCR試劑盒

甲醇/二氯(1:1)中萘溶液　2ml　Adevirus(AV)腺病毒F型染料法熒光定量PCR試劑盒

丙酮中菲-D10溶液　2ml　Adevirus(AV)腺病毒F型探針法熒光定量PCR試劑盒

甲醇/二氯(1:1)中菲溶液　2ml　Adevirus(AV)腺病毒通用PCR試劑盒

甲醇/二氯(1:1)中二氫苊溶液　2ml　Adevirus(AV)腺病毒通用染料法熒光定量PCR試劑盒

甲醇/二氯(1:1)中苯并[K]熒蒽溶液　2ml　Adevirus(AV)腺病毒通用探針法熒光定量PCR試劑盒

甲醇/二氯(1:1)中苯并[b]熒蒽溶液　2ml　Aeromonas hydrophila嗜水氣單胞菌PCR試劑盒

甲醇/二氯(1:1)中苯并[a]蒽溶液　2ml　Aeromonas hydrophila嗜水氣單胞菌染料法熒光定量PCR試劑盒

甲醇/二氯(1:1)中苯并[a]芘溶液　2ml　Aeromonas hydrophila嗜水氣單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒

丙酮中氟甲腈溶液（無證書）　1mL　Aeromonas punctata斑點氣單胞菌PCR試劑盒

丙酮中氟蟲腈硫醚溶液（無證書）　1mL　Aeromonas punctata斑點氣單胞菌染料法熒光定量PCR試劑盒

丙酮中氟蟲腈砜溶液（無證書）　1mL　Aeromonas punctata斑點氣單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒

丙酮中亞砜溶液（無證書）　1mL　Aeromonas salmonicida滅鮭氣單胞菌PCR試劑盒

丙酮中砜溶液（無證書）　1mL　Aeromonas salmonicida滅鮭氣單胞菌染料法熒光定量PCR試劑盒
毛莖點霉保存人白細胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA試劑盒英文名稱：Human Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule，ALCAM ELISA Kit*

人白細胞免疫球蛋白樣受體亞家族B成員4(LILRB4)ELISA試劑盒英文名稱：human leukocyte immuglobulin-like receptor subfamily B member 4,LILRB4 ELISA Kit進口/分裝

人白細胞調節(jié)素(LR)ELISA試劑盒英文名稱：Human leukoregulin，LR ELISA Kit *

人白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒英文名稱：Human Leukemia inhibitory factor,LIF ELISA Kit 進口/分裝

人白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒英文名稱：Human leukemia inhibitory factor receptor，LIFR ELISA Kit *

人百日咳毒素(PT)ELISA試劑盒英文名稱：Human Pertussiu Toxin，PT ELISA Kit*