卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白89抗體 返回列表頁(yè)

免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟：
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器：
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上，十分鐘后棄去，使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液，使其*覆蓋標(biāo)本，置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過(guò)0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標(biāo)本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀(guān)察。觀(guān)察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
詳細(xì)介紹：

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抗體的制備過(guò)程：
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白，通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析，具有高效，特異性強(qiáng)，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進(jìn)行保存。抗體一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià)，而真空干燥保存時(shí)間可以更久。產(chǎn)品僅用于科研保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
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抗體的生活習(xí)性：
(1)結(jié)合特異性抗原：抗體與其他免疫球蛋白分子區(qū)別，就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合，在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見(jiàn)的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)?？贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補(bǔ)體：抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后，借助暴露的補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)去激活補(bǔ)體系統(tǒng)、激發(fā)補(bǔ)體的溶菌、溶細(xì)胞等免疫作用。
(3)結(jié)合細(xì)胞：不同類(lèi)別的免疫球蛋白，可結(jié)合不同種的細(xì)胞，產(chǎn)生不同的疚，參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過(guò)胎盤(pán)及粘膜：免疫球蛋白G(IgG)能通過(guò)胎盤(pán)進(jìn)入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動(dòng)免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過(guò)消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產(chǎn)品僅用于科研具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì)，也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì)，均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類(lèi)沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經(jīng)透析法將其純化。
Collagen VII  Ⅶ膠原羊藿苷4-甲硫基乙酮Human MANF (Mesencephalic Astrocyte Derived Neurotrophic Factor) 檢測(cè)試劑盒

Collagen V  Ⅴ型膠原異補(bǔ)骨脂素4-甲硫基乙酮Human MAP2K1 (Mitogen Activated Protein Kinase Kinase 1) 檢測(cè)試劑盒

Collagen X  Ⅹ型膠原補(bǔ)骨脂素4-甲硫基乙酮Human AhR (Aryl Hydrocarbon Receptor) 檢測(cè)試劑盒

Coactin-6  NB-3神經(jīng)粘附蛋白秦皮甲素Eletriptan HBrHuman ARSA (Arylsulfatase A) 檢測(cè)試劑盒

Claudin 1  緊密連接蛋白1秦皮乙素四甲基氟化銨四水合物Human ASGR2 (Asialoglycoprotein Receptor 2) 檢測(cè)試劑盒

Claudin 3  緊密連接蛋白3熊果酸四甲基氟化銨四水合物Human ASGR1 (Asialoglycoprotein Receptor 1) 檢測(cè)試劑盒

Claudin 4  緊密連接蛋白4冰片四甲基氟化銨四水合物Human ASM (Acid Sphingomyelinase) 檢測(cè)試劑盒

Cortactin  皮層肌動(dòng)蛋白菝契皂苷元1-Boc-2-(氨甲基)吡咯烷Human MAPK14 (Mitogen Activated Protein Kinase 14) 檢測(cè)試劑盒

細(xì)胞角蛋白19Porcine TrxR1 (Thioredoxin Reductase 1) 檢測(cè)試劑盒

細(xì)胞角蛋白2Porcine GnRH (Gonadotropin Releasing Hormone) 檢測(cè)試劑盒

細(xì)胞角蛋白4Porcine CA1 (Carbonic Anhydrase I) 檢測(cè)試劑盒

細(xì)胞色素b245輕鏈Porcine GROα/CXCL1/NAP3 (Growth Regulated Oncogene Alpha) 檢測(cè)試劑盒

5號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框44Porcine ELA4 (Elastase 4) 檢測(cè)試劑盒

心臟特異性絲氨酸蛋白酶Porcine FLRT2 (Fibronectin Leucine Rich Transmembrane Protein 2) 檢測(cè)試劑盒

胞漿型磷脂酶A2Porcine CDK1 (Cyclin Depende Kinase 1) 檢測(cè)試劑盒

細(xì)胞周期及凋亡調(diào)節(jié)蛋白1Porcine ES (Endostatin) 檢測(cè)試劑盒
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白89抗體白色念珠Rat FTH (Ferritin, Heavy Polypeptide)  Kit

乳酸乳球乳亞種Rat IL-19 (Ierleukin 19)  Kit

黑色小單孢Rat IL-20 (Ierleukin 20)  Kit

球孢白僵Rat ALCAM (Activated Leukocyte Cl Adhesion Molecule)  Kit

寄生曲霉Rat IAPP (Islet Amyloid Polypeptide)  Kit

厚粉紅隔孢伏革Rat ANGPTL3 (Angiopoietin Like Protein 3)  Kit

根瘤Rat MAG (Myin Associated Glycoprotein)  Kit

香菇Rat FETUA (Fetuin A)  Kit