熒光假單胞菌保存 返回列表頁(yè)

儀器設(shè)備與器具：
1 恒溫培養(yǎng)箱：36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺(tái)。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平：感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿（直徑為90mm）、試管，經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
規(guī)格參數(shù)：
資源名稱(chēng)  熒光假單胞菌保存
種屬: Pseudomonas│fluorescens

提供形式: 凍干物

安全等級(jí): 1

模式菌株: no

培養(yǎng)基: 0002

生長(zhǎng)條件: 30℃

存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

?
培養(yǎng)方法：
培養(yǎng)基 乳酸菌培養(yǎng)基 Ⅱ：Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐溫) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸鈉) 5g Diamine citrate (檸檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸餾水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃，15min。
傳代方法 ①凍干管：75%酒精擦拭管壁，后用砂輪在凍干管壁劃兩圈，掰斷，用200μL無(wú)菌水或培養(yǎng)基充分溶解，平板涂布，活化培養(yǎng)。 ②斜面：試管口用75%酒精擦拭后，火焰灼燒，后用無(wú)菌接種鏟切塊，挑取接入平板或斜面，培養(yǎng)。
產(chǎn)品僅用于科研生長(zhǎng)條件 30℃，好氧
存儲(chǔ)條件 2-8℃冷藏
低溫存法：
①簡(jiǎn)單保存法，將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1～2個(gè)月，若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3～4個(gè)月；②液氮超低溫保存法，將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中，密封于安瓿管內(nèi)，然后控制冷卻速度，使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí)，即可置于-150～-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲(chóng)、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物，都可用此法長(zhǎng)期保存。
微生物培養(yǎng)方法：
1、平板劃線分離法：把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面，通過(guò)分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)后生長(zhǎng)繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋?zhuān)缓髮⒉煌♂尪鹊木悍謩e涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。
上述兩種方法雖然都可以實(shí)現(xiàn)觀察菌落特征的目的，但平板劃線分離法不能對(duì)菌落計(jì)數(shù)，而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過(guò)程復(fù)雜，對(duì)平板的要求比較高，可參照以下步驟：
a、制備平板培養(yǎng)基將蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃，向蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3～5ml并混合均勻，然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿，輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)皿，使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部，待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱(chēng)取活性污泥土樣15g，放入盛100ml無(wú)菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中，振搖15～20min混合均勻，用一支1ml無(wú)菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無(wú)菌水的大試管中充分混勻，制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml，滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置，用無(wú)菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴(kuò)展，使之分布均勻。
基本概念：
(1)菌群：由多種細(xì)菌混合組成的相對(duì)穩(wěn)定的細(xì)菌群體，產(chǎn)品僅用于科研具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸細(xì)菌及他們之間的過(guò)渡類(lèi)型。
(2) 菌屬：菌種的上一級(jí)分類(lèi)，通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個(gè)菌屬，如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細(xì)菌基本的分類(lèi)單位，通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類(lèi)細(xì)菌群體，與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異；當(dāng)涉及到細(xì)菌保存時(shí)，菌種是指細(xì)菌的種子（用來(lái)長(zhǎng)期保存）資源。
(4) 菌型：同一菌種的不同細(xì)菌，在某些方面存在較小差異的為同一菌型，通常一個(gè)菌種內(nèi)的細(xì)菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株：由一個(gè)獨(dú)立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代，一種微生物的每一個(gè)不同來(lái)源的純培養(yǎng)物均可稱(chēng)為該菌種的一個(gè)菌株。
ACSM3DEPC-treated Water30 ml小鼠可溶性Toll樣受體4(sTLR4)免疫試劑盒

ARTS1DEPC-treated Water5x1 ml小鼠可溶性Toll樣受體2(sTLR2)免疫試劑盒

AIFM26X DNA Loading Dye5x1 ml小鼠可溶性Endoglin(ENG/sCD105)免疫試劑盒

ABL26X MassRuler™ DNA Loading Dye5x1 ml小鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)免疫試劑盒

ACE6X Orange DNA Loading Dye5x1 ml小鼠可溶性CD40配體(sCD40L)免疫試劑盒

ACE22X RNA Loading Dye1 ml小鼠可溶性CD30配體(sCD30L)免疫試劑盒

AcinusX-Gal Solution, ready-to-use10 ml小鼠顆粒酶B(Gzms-B)免疫試劑盒

Ack125 mM MgCl24x1.25 ml小鼠顆粒酶A(Gzms-A)免疫試劑盒
Rabbit Cortisol ELISA試劑盒 Brinzolamide>99%,USP33,BR

rabbit C-Reactive Protein,CRP ELISA試劑盒BrinzolamideHPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

Rabbit Crosslaps,Cr ELISA試劑盒 Ronidazole>98.5%,BR

Rabbit cyclic adesine mophosphate,cAMP ELISA試劑盒Ronidazole>98.5%,BR

Rabbit Cystatin C,Cys-C ELISA試劑盒 RonidazoleHPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

Rabbit D-Dimer,D2D ELISA試劑盒Clodronate disodium tetrahydrate純度≥99%,水合物,BR

rabbit Dehydroepiandrosterone sulfate,DHEA-S ELISA試劑盒 Clodronate disodium tetrahydrate純度≥99%,水合物,BR

Rabbit Dihydro testosterone,DHT ELISA試劑盒Ethyl celluloseCP

rabbit Endostatin,ES ELISA試劑盒 Ethyl celluloseCP

Rabbit Endothelial nitric oxide synthase 3,eS-3 ELISA試劑盒 Vitamin K1>98.0%,油狀

Rabbit Endothelial nitric oxide synthase,eS ELISA試劑盒 Vitamin K1>98.0%,油狀

rabbit Endothelin 1,ET-1 ELISA試劑盒 Vitamin K1>98.0%,油狀

Rabbit Epidermal growth factor,EGF ELISA試劑盒 9-Ami-micycline HCl>97.0%（HPLC）

Rabbit E-Selectin ELISA試劑盒 9-Ami-micycline HCl>97.0%（HPLC）

rabbit Estradiol,E2 ELISA試劑盒9-Ami-micycline HCl>97.0%（HPLC）
熒光假單胞菌保存人骨肉瘤細(xì)胞，SJSA-1細(xì)胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶

人骨肉瘤細(xì)胞，sw1353細(xì)胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶

人骨髓漿細(xì)胞瘤株，AMO-1細(xì)胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶

人骨髓瘤細(xì)胞，NCI-H929細(xì)胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶

人骨髓瘤細(xì)胞，OPM2細(xì)胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶

人黑色素瘤細(xì)胞，A875細(xì)胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶