細胞色素P450Ⅱj3抗體 返回列表頁

免疫熒光技術的實驗步驟：
一、準備好試劑與儀器：
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標本片上，十分鐘后棄去，使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液，使其*覆蓋標本，置于有蓋搪瓷盒內，保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
詳細介紹：

?
抗體的制備過程：
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白，通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量生產時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進一步的純化，利用偶聯了抗原的親和柱進行層析，具有高效，特異性強，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價，而真空干燥保存時間可以更久。產品僅用于科研保存前需經除菌并添加防腐劑。
?
抗體的生活習性：
(1)結合特異性抗原：抗體與其他免疫球蛋白分子區別，就在于抗體能與相應抗原發生特異性結合，在體內導致生理或病理效應;在體外產生各種直接或間接的可見的抗原抗體結合反應。抗體是靠其分子上的特殊的結合部位與抗原結合的。
(2)激活補體：抗體與相應抗原結合后，借助暴露的補體結合點去激活補體系統、激發補體的溶菌、溶細胞等免疫作用。
(3)結合細胞：不同類別的免疫球蛋白，可結合不同種的細胞，產生不同的疚，參與免疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產品僅用于科研具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質，也具有刺激機體產生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質，均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經透析法將其純化。
凍干血漿成骨細胞培養基虹膜色素上皮細胞factor VIII  第八因子相關抗原(多肽片斷抗原)

DNA酶瓊脂軟骨細胞培養基晶狀體上皮細胞FAS (Apo-a1; CD95;)(抗原)  載脂蛋白-a1

7.5%肉湯滑膜細胞培養基角膜上皮細胞Agrin peptide  聚集蛋白抗原

7.5%肉湯髓核細胞培養基角膜內皮細胞Agtr1/AT1a(Angiotensin II receptor, type 1a)  血管組織血管緊張素Ⅱ1型受體抗原

普通肉湯培養基肝細胞培養基視網膜神經節細胞FasL(抗原)  

亞碲酸鈉肉湯培養基基礎星形細胞培養基骨細胞Ah Receptor(Aryl Hydrocarbon Receptor)  芳香烴受體抗原

葡萄球菌增菌肉湯心肌細胞培養基滑膜細胞Fe65 protein peptide  Fe65 蛋白（多肽抗原）

葡萄球菌選擇性瓊脂滋養層細胞培養基骨骼肌細胞FGF1 (aFGF )(ECGF-beta)(HBGF-1)  肝素結合生長因子( 酸性成纖維細胞生長因子）（多肽片斷抗原）

Gentamicin/FITC  熒光素標記慶大霉素IgG膜糖蛋白CD2002-羥基-5-三氟甲基吡啶Rat PTH (Parathyroid Hormone) 檢測試劑盒

GFAP/FITC  熒光素標記膠質纖維酸性蛋白IgG胰羧肽酶A12-羥基-5-三氟甲基吡啶Rat PTHR2 (Parathyroid Hormone Receptor 2) 檢測試劑盒

GFP/FITC  熒光素標記綠色熒光蛋白IgG羧肽酶A23,6-二溴-9-乙基咔唑Rat PTHRP (Parathyroid Hormone Related Protein) 檢測試劑盒

GFP/FITC  熒光素標記綠色熒光蛋白IgG腦源性免疫球蛋白超家族蛋白33,6-二溴-9-乙基咔唑Rat PDAP1 (Pdgfa Associated Protein 1) 檢測試劑盒

GFP/FITC (Green Fluorecent protein)  熒光素標記兔抗綠色熒光蛋白IgG胰羧肽酶B1(3-氯-2-羥基)*基氯化銨 溶液Rat PTD (Pentosidine) 檢測試劑盒

human Fibrinogen/Biotin  生物素化兔抗人纖維蛋白原細胞維甲酸結合蛋白2(3-氯-2-羥基)*基氯化銨 溶液Rat PP (Pepsin) 檢測試劑盒

GFR Alpha-1/GDNF /FITC  熒光素標記GDNF家族受體α-1IgG2號染色體開放閱讀框802,5-二甲氧基二Rat PYY (Peptide YY) 檢測試劑盒

GFRA4/FITC  熒光素標記GDNF家族受體α-4IgG磷酸化CD32B2,5-二甲氧基二Rat PRF1 (Perforin 1) 檢測試劑盒  
細胞色素P450Ⅱj3抗體釀酒酵母Mouse PAL (L-Phenylalanine ammonla-lyase)  Kit

副豬嗜血桿Mouse LHRH (Luteinizing Hormone-Reasing Hormone)  Kit

強壯類芽孢桿Mouse LFA-3 (lymphocyte function associated antigen 3)  Kit

費希爾曲霉Mouse Lptn/XCL1 (Lymphotactin)  Kit

釀酒酵母Mouse LZM (Lysozyme)  Kit

栗疫Mouse BSP (Bone Sialoprotein)  Kit

米曲霉Mouse MIP-1δ (Macrophage Inflammatory Protein 1δ)  Kit

J53大腸Mouse FPN (Ferroportin)  Kit