單克隆抗體制備的基本過程

單克隆抗體制備的基本過程如下：

1、用抗原免疫小鼠；

2、從抗原免疫過的小鼠獲取脾細胞；

3、應用細胞雜交技術使骨髓瘤細胞與B淋巴細胞融合，得到雜交瘤細胞。這種細胞不僅能夠像B淋巴細胞一樣合成性質穩定的轉移性抗體，而且能夠像骨髓瘤細胞一樣無限復制，這樣就可以產生大量且性質專一的鼠源抗體；

4、對獲得的雜交瘤細胞進行篩選，選出能分泌高效價抗體的雜交瘤；

5、對已篩選出的單個細胞進行鑒定和克隆。

雜交瘤產生的單克隆抗體在各個領域中應用越來越廣，有很大的優點和潛力。能夠根據需要進行研發生產，可建立穩定的細胞株持續供給應用，相比于抗血清能夠減少大量的動物和費用，而且純度高，均一性好，可作為一種標準試劑。

在獲得能分泌高效價抗體的雜交瘤細胞株后，一般有兩種方法來獲得單克隆抗體：小鼠腹腔注射雜交瘤細胞和細胞培養。

1）、小鼠腹水：

將雜交瘤細胞接種到小鼠的腹腔，雜交瘤在腹腔內增殖，取得腹水進行純化即可得到抗體。此法易于操作，重復性高，且花費少，得到的抗體量多，但傷害動物，而且當需要大規模制備抗體時需要大量動物。

2）、細胞培養：

將雜交瘤細胞進行培養，培養后的上清液中即含有抗體。這種方法適合大規模生產抗體。但是這種方法獲得的抗體雜質相對較多，因為細胞上清含有培養液，pH指示劑，細胞代謝廢物等。而且培養用的血清中的成分不明確，可能會含有能影響抗體純度的雜蛋白。所以在細胞培養中會逐漸將雜交瘤細胞通過逐步減少血清來馴化到無血清培養。

總之，單克隆抗體的高特異性，重復性使其在生物研究以及醫藥方向都有良好的應用基礎以及前景。