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當前位置：上海撫生實業(yè)有限公司>>細胞系>>人細胞系>> B901L細胞
| 貨號 | AXB6135 | 規(guī)格 | T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 英文名稱 | B901L；B901L | 產(chǎn)品分類 | 人細胞系 |
公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！
細胞傳代：
1. B901L細胞試驗準備：200ul/1mlTip 頭各一盒(以上物品均需高壓滅菌)，酒精棉球，廢液缸，試管架，微量移液器，記號筆，培養(yǎng)皿，離心管。
2. 棄掉培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基，用 1ml 的 PBS 溶液洗滌兩次。
3. 用 Tip 頭加入 1ml Trypsin 液，消化 1 分鐘(37℃，5%CO2 )。用手輕拍培養(yǎng)瓶壁，觀察到細胞從壁上脫落下來為止。
4. 加入 1ml 的含血清培養(yǎng)基終止反應(yīng)。
5. 用 Tip 頭多次吹吸，使細胞分散開。
6. 將培養(yǎng)液裝入離心管中，1000rpm 離心 5min。
7. 用培養(yǎng)液重懸細胞，細胞計數(shù)后選擇 0.8X106 個細胞加入一個 35mm 培養(yǎng)皿。
8. 將合適體積培養(yǎng)液加入離心管中，混勻細胞后輕輕加入培養(yǎng)皿中，使其均勻分布。
9. 將培養(yǎng)皿轉(zhuǎn)入 CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，第二天轉(zhuǎn)染。
細胞轉(zhuǎn)染：
1. 轉(zhuǎn)染試劑的準備
① 將 400ul 去核酸酶水加入管中，震蕩 10 秒鐘，溶解脂狀物。
② 震蕩后將試劑放在－20 攝氏度保存，使用前還需震蕩。
2. 選擇合適的混合比例(1：1－1：2/脂質(zhì)體體積：DNA 質(zhì)量)來轉(zhuǎn)染細胞。在一個轉(zhuǎn)染管中加入合適體積的無血清培養(yǎng)基。加入合適質(zhì)量的 MyoD 或者 EGFP 的 DNA，震蕩后在加入合適體積的轉(zhuǎn)染試劑，再次震蕩。
肌管素相關(guān)蛋白8封閉多肽 | sRANKL 小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基ELISA檢測試劑盒 |
自噬相關(guān)蛋白12封閉多肽 | 豬γ干擾素(IFN-γ)elisa試劑盒 |
10號染色體開放閱讀框96封閉多肽 | 大鼠解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9) ELISA試劑盒 |
160kDa內(nèi)含子結(jié)合蛋白封閉多肽 | 大鼠6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA試劑盒 |
磷酸化D酸激酶衰減蛋白2封閉多肽 | 豬白介素3(IL-3)ELISA試劑盒 |
糖原合酶激酶-3β封閉多肽 | B-Raf原癌基因/蘇酸蛋白激酶ELISA試劑盒 |
12號染色體開放閱讀框31封閉多肽 | Ashwin蛋白ELISA試劑盒 |
組織相容性復(fù)合物相關(guān)蛋白MR1封閉多肽 | Advillin蛋白ELISA試劑盒 |
重組人程序性死亡配體1蛋白 | 1,3-DPG 人1,3-二磷酸甘油酸ELISA檢測試劑盒 |
葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白1封閉多肽 | 組織型纖溶酶原激活因子(tPA)ELISA試劑盒 |
膠質(zhì)細胞谷氨載蛋白3/神經(jīng)/上皮細胞谷酸運載蛋白封閉多肽 | 2，3－二磷酸甘油酸ELISA試劑盒 |
NADPH氧化酶活化蛋白1封閉多肽 | B901L細胞組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒 |
突觸結(jié)合蛋白1封閉多肽 | 12羥二十烷四烯酸(12-HETE)ELISA試劑盒 |
組織相容性復(fù)合物1A1封閉多肽 | 1,5-脫水葡萄糖醇(1,5-AG)ELISA試劑盒 |
組織型纖溶酶原激活劑封閉多肽 | Ⅱ型膠原代謝產(chǎn)物C2CELISA試劑盒 |
細胞培養(yǎng)實驗基本操作：
①進無菌室前要洗手，按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。
②操作者動作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過燒灼進行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長時間燒灼，以防退火；燒過的器械要冷卻后才能使用；已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會產(chǎn)生有害物質(zhì)，吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長，以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體，危害培養(yǎng)細胞，同時塑料細胞培養(yǎng)用品也會產(chǎn)生變形影響使用。
③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶，開瓶后的培養(yǎng)液應(yīng)保持斜位，避免直立，以防止下落細菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應(yīng)立即封閉瓶口，培養(yǎng)的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。
④操作時盡量不要談話，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。
⑤吸取培養(yǎng)液、細胞懸液時，應(yīng)專管專用，一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去，以防止污染擴大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。
⑥操作完畢后應(yīng)整理好工作臺面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面；防止細胞交叉污染：所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備，一旦懷疑發(fā)生交叉污染，可做細胞遺傳學(xué)方面的鑒定，如發(fā)現(xiàn)原有的細胞遺傳物發(fā)生改變，可以復(fù)蘇早期凍存的細胞使用。
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