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    何副總參與廈門大學犬促卵泡素(fsh)elisa試劑盒實驗

    時間:2013/8/27閱讀:1388
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    廈門大學的老師在購買“犬促卵泡素(fsh)elisa試劑盒”的時候,選擇了上海滬鼎,為了感謝廈門老師對我司的支持,我司何副總參與了“犬促卵泡素(fsh)elisa試劑盒”實驗,祝老師實驗取得成功。

    犬促卵泡素(fsh)elisa試劑盒簡介:

    促卵泡素(FSH)是動物腦垂體分泌作用于卵巢卵泡生長、發育、分化、成熟和排卵的重要繁殖激素.由于是生物大分子,不能透過細胞膜,FSH必須與靶細胞膜上的促卵泡素受體(FSHR)結合,經過受體介導將信息傳遞到靶細胞內,才能發揮其生物學功能。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯免疫吸附測定試劑盒(ELISA)。預先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體,經生物素(biotin)標記。樣品和生物素標記抗體先后加入酶標板孔反應后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應;經過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關。

    犬促卵泡素(fsh)elisa試劑盒實驗操作程序】
    1. 確定本次檢測所需的已包被小鼠FSH抗體的酶標板孔數目。
    2. 將倍比稀釋的小鼠FSH標準品各0.1ml依次加入一排7孔中,1孔只加樣品稀釋液的作為對照。處理后的標本按100ul每孔加入。
    3. 酶標板加上蓋,37℃反應90分鐘。
    4. 反應后用自動洗板機吸去酶標板內的液體;或甩去酶標板內液體,再對著吸水紙拍幾下。洗滌2次。
    5. 將準備好的生物素小鼠FSH抗體工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反應60分鐘。
    6. 0.01M TBS或0.01M PBS洗滌3次,每次浸泡1分鐘左右。
    7. 將準備好的ABC工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反應30分鐘。
    8. 0.01M TBS或0.01M PBS洗滌5次,每次浸泡1-2分鐘左右。
    9. 按每孔0.1ml依次加入TMB顯色工作液,37℃避光反應,反應過程中,要經常的觀察,當肉眼可見小鼠FSH標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔差別不明顯時,即可加入TMB終止液0.1ml/孔。(顯色反應zui長不要超過30分鐘)。
    10. 用酶標儀在450nm測定O.D.值。
    11. 根據樣品的吸光值在坐標上找出對應的濃度。用戶也可以使用各種應用軟件來計算。應記住由于樣品稀釋了N倍,其實際濃度應該×N。

    犬促卵泡素(fsh)elisa試劑盒實驗注意事項】
    1. 從-20℃取出的試劑盒,在4℃解凍過夜。盒內每一瓶解凍的溶液在開啟瓶蓋之前都要輕輕搖勻,避免解凍時出現的分層,否則會出現濃度不均一的現象。
    2. 開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。
    3. 配制各種試劑時,切記混勻!
    4. 用戶在初次使用試劑盒時,應將各種試劑管離心數分鐘,以便試劑集中到管底。
    5. 建議所有小鼠FSH標準品、樣本都做雙份檢測。
    6. 要嚴格避免操作過程中酶標板干燥。干燥會使酶標板上生物成份迅速失活!
    7. 為免交叉污染,要避免重復使用手中的吸頭和試管。

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