細菌培養之單一菌落 （single colony）分離

藥品試劑：
E. coli K-12 菌株 （JM109）
LB agar plates：
1% （w/v） Bacto tryptone, 0.5% Bacto yeast extract, 1% NaCl，以5 N NaOH 調至pH 7.0 后，加入1.5% （w/v） Bacto agar，以濕熱法滅菌。

方法步驟：
1） 每組取一個LB plate，在培養皿底部標明組別及日期，并寫上JM109。
2） 將接種環在酒精燈火焰上燒紅，接種環上方部份亦得以火焰燒過。另一手將生長有JM109 之培養皿蓋子拿起數吋，將接種環在培養基空白處輕戳數次以使冷卻。
◆ 注意！ 蓋子請勿全開或置于實驗桌上！
◆ 接種環請勿放置在桌上或接觸到其它東西！
3） 以接種環輕輕刮下菌落，并將培養皿蓋子置回。
4） 打開空白的LB plate，將沾有菌落的接種環于其上輕輕連畫數條橫線后，將培養皿蓋子置回。
5） 再次將接種環在酒精燈火焰上燒紅 并使冷卻。 將培養皿旋轉約60 度，畫第二次線。
6） 重復上一步驟之操作，畫第三次線。
7） 將接種環在火焰上燒紅滅菌后方可置回實驗桌上。
8） 將培養皿倒置，于37℃培養箱中培養過夜。