用免疫親和反應選擇gⅥ—cDKA噬菌體文庫

[方法]
1.用10m1含1%（w/v）BSA的PBST稀釋2．5ul抗血清，并倒入15ml聚丙烯管中，再加入1011～1012TU的gⅥ—cDNA噬菌體文庫。
2．室溫下緩慢旋轉孵育該混合物1小時。
3．往混合物中加500ul 1/1（體積比）蛋白A—瓊脂糖凝膠珠漿[在PBST用5%（w/v）BSA預處理]，在室溫下再孵育l小時。
4．離心（500g 5分鐘）收集蛋白A—瓊脂糖凝膠珠并且用10ml PBST沖洗蛋白A—瓊脂糖凝膠珠10次。
5．在1ml PBST溶液中打散蛋白A—瓊脂糖凝膠珠，將混合物轉移到微離心管中并旋轉（10000g 10秒），除去上清液。
6．0．5m1 0．1mol/L鹽酸*，pH 2．2，并加入0．1%（w/v）BSA溶液中打散蛋白A—瓊脂糖凝膠珠。
7．室溫下孵育樣品10分鐘。
8．快速離心樣品（10000g 10秒）并將上清液轉移到一新的微離心管中。
9．加30ul 2mol/LTrls中和該溶液，在冰浴中保存溶液。
10．噬菌體擴增，將抽提出來的一半噬菌體（256ul）加到平板Topl0F’細胞中。37℃溫育30分鐘。