原代培養與傳代培養有哪些實質區別分析

實驗中，我們常常把原代培養與傳代培養的定義弄混，因此實驗不成功。據上海勁馬實驗設備公司實驗室提供原代培養及傳代培養中有哪些實質性的區別分析：

原代培養:即*次培養，是指將培養物放置在體外生長環境中持續培養，中途不分割培養物的培養過程。
有幾方面含義:培養物一經接種到培養器皿（瓶）中就不在分割，任其生長繁殖；       原代培養中的“代”并非細胞的“代”數，因為培養過程中細胞經多次分裂已經產生多代子細胞；
原代培養過程中不分割培養物不等于不更換培養液，也不等于不更換培養器皿。正常 細胞培養 的世代數有限，只有癌細胞和發生轉化的細胞才能無限生長下去。所謂轉化即是指正常細胞在某種因子的作用下發生突變而具有癌性的細胞。目前世界上許多實驗室所廣泛傳用的HeLa細胞系就是1951年從一位名叫Henrietta Lacks的婦女身上取下的宮頸癌 細胞培養 而成。此細胞系一直延用至今。  
原代培養的細胞一般傳至10代左右就不易傳下去了，細胞的生長就會出現停滯，大部分細胞衰老死亡。但是有極少數的細胞能夠度過“危機”而繼續傳下去，這些存活的細胞一般能夠傳到40～50代，這種傳代細胞叫做細胞株。細胞株的遺傳物質沒有發生改變,在培養過程中其特征始終保持。當細胞株傳至50代以后又會出現“危機”，不能再傳下去。但是有部分細胞的遺傳物質發生了改變，并且帶有癌變的特點，有可能在培養條件下無限制地傳代下去，這種傳代細胞稱為細胞系。  原代培養是建立各種細胞系（株）必經的階段，其是否成功與組織污染與否、供體年齡、培養技術和方法、適宜培養基的選擇等多種因素有關。由于原代培養的細胞轉化性極小，對病毒敏感性好，因此適應制備疫苗等生物制品；但也存在有潛在外源因子、不能事先檢查標本、且受供體年齡健康狀況的影響而導致批間差異大等缺陷。
目前常用的原代 細胞培養 有雞胚成纖維細胞及豬腎、猴腎、地鼠腎等原代細胞。
原代培養的基本過程包括取材、培養材料的制備、接種、加培養液、置培養條件下培養等步驟，在所有的操作過程中，都必須保持培養物及生長環境的無菌。  
多數情況下，分散的細胞若屬于貼壁依賴型細胞，就能黏附、鋪展于培養器皿和載體表面生長而形成細胞單層，這種培養方式稱為單層 細胞培養 （monolayer culture），又叫貼壁培養（adherent culture）。少數情況下，培養的細胞沒有貼壁依賴性，可通過專門設備使細胞始終處于懸狀態而在體外生長，這種形式稱為懸浮培養（suspension culture）。如何讓接種的細胞盡快貼壁，是決定培養成功的關鍵步驟：
取決于適當的生長基質表面；
可降低接種后培養液對細胞的浮力，如先少補加少量培養液，待細胞貼壁后再補足營養液繼續培養；
注意適當的細胞接種密度，一般105個/ml左右。
傳代培養:當原代培養成功以后，隨著培養時間的延長和細胞不斷分裂，一則細胞之間相互接觸而發生接觸性抑制，生長速度減慢甚至停止；另一方面也會因營養物不足和代謝物積累而不利于生長或發生中毒。此時就需要將培養物分割成小的部分，重新接種到另外的培養器皿（瓶）內，再進行培養。這個過程就稱為傳代（passage）或者再培養（subculture）。對單層培養而言，80%匯合或剛匯合的細胞是較理想的傳代階段。  體外培養技術中所謂的傳“代”概念并不等于細胞生物學中“親代細胞”與“子代細胞”中“代”的概念。傳代培養的實質就是分割后再一次培養，可以相對地衡量培養物的培養年齡

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