過氧化氫酶（CAT）試劑盒的檢測原理以及自備儀器

上海百蕊生物代理銷售過氧化氫酶（CAT）試劑盒，現貨供應，歡迎。

過氧化氫酶（CAT）試劑盒測定原理H2O2 在 240nm 下有特征吸收峰，CAT 能夠分解 H2O2，使反應溶液 240nm 下的吸光度隨反 應時間而下降，根據吸光度的變化率可計算出 CAT 活性。

需自備的儀器和用品：紫外分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96 孔板（UV 板）、 研缽、冰和蒸餾水

試劑組成和配制：提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存； 試劑一：液體 30mL×1 瓶，4℃保存； 試劑二：液體 125μL×1 瓶，4℃保存。

1、細菌、細胞或組織樣品的制備

收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；按照每 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液， 超聲波破碎細菌或細胞(冰浴，功率 20％或 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復 30 次）；8000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。

稱取約 0.1g 組織，加入 1mL 提取液進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min，取上清，置 冰上待測。

2、血清（漿）樣品：直接檢測。

測定步驟：

1、 分光光度計或酶標儀預熱 30min 以上，調節波長至 240nm，蒸餾水調零。

2、CAT 檢測工作液的配制：用時在試劑二中加入 25mL 試劑一，充分混勻，作為工作液。

3、測定前將 CAT 檢測工作液在 37℃（哺乳動物）或 25℃（其它物種）水浴 10min 以上。

4、在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 10μL 樣本和 190μL 工作液，立即混勻并計時，記錄

240nm 下初始吸光值 A1 和 1min 后的吸光值 A2。計算 ΔA＝A1-A2。