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當(dāng)前位置：上海撫生實業(yè)有限公司>>細胞系>>人細胞系>> 5637 (人膀胱癌細胞)
| 貨號 | A01X627 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁細胞 |
公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
| 產(chǎn)品名稱 | 5637 (人膀胱癌細胞) | 貨號 | A01X627 |
| 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名稱 | 5637:5637 |
| 分類 | 人細胞系 | 用途 | 僅供科研實驗 |
商品介紹：
| 鑒定 | (STR鑒定正確) |
| 種屬 | 人 |
| 生長特性 | 貼壁細胞 |
| 細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 |
| 凍存條件 | 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO溫度：液氮 |
| 培養(yǎng)方案A（默認） | 生長培養(yǎng)基: RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S培養(yǎng)條件: 氣相：空氣，95%；CO2，5%, 溫度：37℃ |
| 推薦傳代比例 | 1:3-1:4 |
| 推薦換液頻率 | 2-3次/周 |
| 注意事項 | 該細胞較難消化，注意延長消化時間，消化到細胞收縮變圓，輕拍培養(yǎng)瓶側(cè)邊，細胞可以滑落方可終止消化。 |
| 背景描述 | 5637細胞能生成SCF、IL-1、IL-3、IL-6、G-CSF、GM-CSF等。 |
| 年齡（性別） | 男性；68歲 |
| 組織來源 | 膀胱；癌 |
| 細胞類型 | 腫瘤細胞 |
| 腫瘤類型 | 膀胱癌細胞 |
| 生物安全等級 | BSL-1 |
| 倍增時間 | ~24-36 hours |
| 致瘤性 | Yes, within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells. |
| 保藏機構(gòu) | ATCC; HTB-9 DSMZ; ACC-35 |
細胞凍存注意事項：
(1) 細胞的收獲
用來凍存的細胞一般選擇在細胞約鋪滿 90% 的時候，這時細胞生長狀態(tài)好，細胞數(shù)量也多，并且在收獲細胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細胞開始時方法和平時一樣，用 100xg 離心 5 分鐘收集細胞再重懸，活細胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細胞保存的最終細胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細胞 /ml )，加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護劑混合溶液中輕輕混勻，分裝到凍存管，冷凍保存。
(2) 保護劑的使用
細胞凍存中， 一般使用DMSO 作為保護劑。在細胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細胞特別是雜交瘤細胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍，再與等體積的懸浮細胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細胞凍存的速率
細胞的冷凍速率最適控制在讓細胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細胞損害。對大多數(shù)細胞來說，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細胞先在-20℃1-2個小時，再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間，細胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態(tài)層，因為這樣可避免由于有液氮進入凍存管而在拿出細胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮，需要經(jīng)常添加)。細胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
操作步驟:
(1) 細胞系培養(yǎng)：取6cm細胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個細胞培養(yǎng)液，37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%，密度過大，轉(zhuǎn)染后不利篩選細胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個孔細胞所用的量)
A液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備：用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染：把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中，搖勻，37℃溫箱置6~24小時，吸除無血清轉(zhuǎn)染液，換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時轉(zhuǎn)染后，可在48h-72h細胞長滿之后，提取細胞蛋白或者RNA，驗證敲減/過表達效率。
公司正在出售的產(chǎn)品：
| CFPAC-1人胰腺癌細胞 | One-Step Firefly Luciferase Assay Kit（一步法螢火蟲螢光素酶報告基因檢測試劑盒） |
| CoC1人卵巢癌細胞 | D-Luciferin, Potassium Salt（D-螢光素鉀鹽） |
| COLO205人結(jié)腸癌細胞 | D-Luciferin, Potassium Salt（D-螢光素鉀鹽） |
| COLO320人結(jié)直腸腺癌細胞 | D-Luciferin, Sodium Salt（D-螢光素鈉鹽） |
| COLO320 DM 人結(jié)直腸腺癌細胞 | D-Luciferin, Sodium Salt（D-螢光素鈉鹽） |
| COLO320 HSR人結(jié)直腸腺癌細胞 | BCA 蛋白定量檢測試劑盒 |
| COV434人卵巢顆粒腫瘤細胞 | BCA 蛋白定量檢測試劑盒 |
| CW-2人結(jié)腸癌細胞 | BCA 蛋白定量檢測試劑盒（即用型） |
| cx-1結(jié)腸癌細胞 | WonderOrange 蛋白定量試劑盒 |
| D283 Med人腦髓母細胞瘤細胞 | WonderOrange 蛋白定量試劑盒 |
| D341 Med人腦髓母細胞瘤細胞 | 麗春紅染色液(1×) |
| DAMI人巨核細胞白血病細胞 | 考馬斯亮藍快速染色液（免脫色） |
| DAOY人髓母細胞瘤細胞 | Western及IP細胞裂解液 |
| DAUDI人Burkitt's淋巴瘤細胞 | RIPA裂解液（強，無抑制劑） |
| DB人彌漫性大B細胞淋巴瘤細胞 | RIPA裂解液（強，無抑制劑） |
| DLD-1人結(jié)直腸腺癌細胞 | 磷酸酶抑制劑混合液（EDTA-Free，100×） |
| DMS 53人肺癌細胞 | 磷酸酶抑制劑混合液（EDTA-Free，100×） |
| DMS 114人小細胞肺癌細胞 | 5637 (人膀胱癌細胞)蛋白酶抑制劑混合液（EDTA-Free，100× in DMSO） |
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