HSPG人硫酸肝素糖蛋白ELISA試劑盒實驗原理 返回列表頁

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公司“質量是企業是生命之源”，選購優勢如下：
公司產品僅用于科研

1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿，細胞培養上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標齊全：生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質金屬蛋白酶等等

ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術要求，在檢測過程中除正常反應外，有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有：
①標本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作，必能得出準確的實驗結果，可提供免費技術咨詢服務！
操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設3個平行孔；設兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。 
（2）酶標板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內反應液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標板置37℃培養箱的濕盒內，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標板置37℃培養箱的濕盒內，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數據處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
樣本實驗前準備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（2）血漿：
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細胞培養上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。
（5）培養細胞
檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（6）組織標本
切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
T/G HA-VSMC(人血管平滑肌) 5×106cells/瓶×2 B16(鼠黑色素瘤)

CM-M063鼠腎球內皮*培養基100mL

TIGIT Others Mouse 鼠 TIGIT / VSTM3 人裂解液 (陽性對照)

WEHI-231鼠B淋巴 WEHI-231 B lymphocyte in mice DMEM+10% FBS+0.05mM β-Mercaptoethanol

IL23 Protein Mouse 重組鼠 IL-23 (IL23A & IL12B Heterodimer) 蛋白

鼠腎動脈內皮*培養基 100mL

IL-17C  白介素-17C抗體規格： 0.2ml

IL-17D/IL-27  白介素-17D抗體規格： 0.2ml

IL-17E/IL-25  白介素-17E抗體規格： 0.2ml

IL-17F/IL-24  白介素-17F抗體規格： 0.2ml

IL-27R/TCCR  白介素27受體抗體規格： 0.2ml

L(+)Arginine分子式：C6H14N4O2分子量：174.2

L(+)Arginine分子式：C6H14N4O2分子量：174.2

L(+)Asparagine monohydrate分子式：C4H10N2O4分子量：150.13

L(+)Asparagine monohydrate分子式：C4H10N2O4分子量：150.13

L(+)Asparagine monohydrate分子式：C4H10N2O4分子量：150.13

L(+)Citrulline分子式：C6H13N3O3分子量：175.19

L(+)Citrulline分子式：C6H13N3O3分子量：175.19

L(+)Citrulline分子式：C6H13N3O3分子量：175.19

L(+)Glutamic acid hydrochloride分子式：C5H10CLNO4分子量：183.59

L(+)Glutamic acid hydrochloride分子式：C5H10CLNO4分子量：183.59

L(+)Glutamic acid hydrochloride分子式：C5H10CLNO4分子量：183.59

L(+)Glutamic acid分子式：C5H9NO4分子量：147.13

L(+)Glutamic acid分子式：C5H9NO4分子量：147.13

L(+)Glutamic acid分子式：C5H9NO4分子量：147.13

L(+)Glutamic acid分子式：C5H9NO4分子量：147.13

L(+)Glutamic acid分子式：C5H9NO4分子量：147.13

L(+)Glutamic acid分子式：C5H9NO4分子量：147.13

L(+)Monosodium glutamate monohydrate分子式：C5H10NNAO5分子量：187.13

L(+)Monosodium glutamate monohydrate分子式：C5H10NNAO5分子量：187.13

L(+)Monosodium glutamate monohydrate分子式：C5H10NNAO5分子量：187.13

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