當前位置:上海撫生實業有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>人ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96THLE人白細胞彈性蛋白酶ELISA試劑盒實驗原理
公司“質量是企業是生命之源”,選購優勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質金屬蛋白酶等等
產品名稱 | HLE人白細胞彈性蛋白酶ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human leukocyte exastase, HLE Elisa Kit |
貨號 | FS-H63851 |
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結果,可提供免費技術咨詢服務!
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樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
Chlorpheniramine Malea 馬來那敏別名: 馬來那敏;馬來吡;撲爾敏;屈米通;馬來吡胺;馬來曲米通;1-對-1-(2-吡基)-3-二基丙烷英文名稱: Chlorpheniramine malea;Chlorphenamine hydrogen malea;1-p-Chlorophenyl-1-(2-pyridyl)-3-dimethylaminopropane malea;1-(N,N-Dimethylamino)-3-(p-chlorophenyl)-3-(alpha-pyridyl)propane malea: 113-92-8分子式: C16H19ClN2·C4H4O4
N-BOC-1,2,3,6-四氫吡英文名稱: rt-butyl 1,2,3,6-trahydropyridine-1-carboxyla: 85838-94-4純度: 97%單位: 瓶
Arsuna 青蒿琥酯別名: 青蒿脂;還原青蒿琥珀單酯;青蒿琥脂;青蒿酯英文名稱: Arsuna: 88495-63-0分子式: C19H28O8
Gefitinib 吉非替尼別名: N-(3--4-基)-7-甲氧基-6-(3-嗎啉-4-丙氧基)喹唑啉-4-胺; 易瑞沙(阿斯利康公司的抗腫瘤新藥); 吉非替尼(易瑞沙)英文名稱: Gefitinib: 184475-35-2分子式: C22H24ClFN4O3
Moxifloxacin hydrochloride 莫西沙星鹽鹽英文名稱: Moxifloxacin hydrochloride: 186826-86-8分子式: C21H25ClFN3O4分子量: 437.89
Gemcitabine hydrochloride 鹽吉西他濱英文名稱: Gemcitabine hydrochloride: 122111-03-9分子式: C9H11F2N3O4·HCl分子量: 299.66
Metyrapone 美替拉別名: 2-甲基-?1,2-?二-?3-?吡基-?1-?丙 Su-4885 美替拉英文名稱: Metyrapone: 54-36-4分子式: C14H14N2O
Famotidine 法莫替丁別名: 3-[[[2-[(二氨基亞甲基)-4-噻唑基]甲基]硫代]-N-氨磺酰丙脒;3-[[[2-[(二氨基亞甲基)氨基]-4-噻唑基]甲基]硫代]-N-氨磺酰基丙咪英文名稱: Famotidine: 76824-35-6分子式: C8H15N7O2S3
HLE人白細胞彈性蛋白酶ELISA試劑盒實驗原理TCRG T受體γ抗體三磷腺苷酶家族蛋白2抗體聚(乙二)甲基烯酯Mouse GATA1 (GATA Binding Protein 1) ELISA Kit
T Beta 10 胸腺素β10抗體AKIRIN1蛋白抗體2-溴乙胺氫溴鹽Mouse GATA2 (GATA Binding Protein 2) ELISA Kit
Ulex Europaeus Lectin 1/UEA1 荊豆凝集素1抗體錨定蛋白樣蛋白1抗體2-溴乙胺氫溴鹽Mouse GATA3 (GATA Binding Protein 3) ELISA Kit
Urocortin 新型血管活性因子UCN抗體腺苷激酶2抗體2-溴乙胺氫溴鹽Mouse GATA4 (GATA Binding Protein 4) ELISA Kit
Urocortin 新型血管活性因子UCN抗體頂體前體蛋白抗體Phe-PheMouse GATA5 (GATA Binding Protein 5) ELISA Kit
Urocortin 3 尿皮質素UCN3抗體黑色素瘤缺失樣蛋白1抗體(S)-(+)-1-苯基-1,2-乙二Mouse GS (Gelsolin) ELISA Kit
galectin 9 半乳糖凝集素9抗體未知糖基化轉移酶AER61抗體(S)-(+)-1-苯基-1,2-乙二Mouse GTFIIB (General Tranion Factor IIB) ELISA Kit
UCP-1 線粒體脫偶連蛋白1抗體鐵蛋白Fe65抗體(S)-(+)-1-苯基-1,2-乙二Mouse GTF2H1 (General Tranion Factor IIH, Polypeptide 1) ELISA Kit
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