DBH人多巴胺-β羥化酶ELISA試劑盒實驗原理 返回列表頁

ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術要求，在檢測過程中除正常反應外，有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有：
①標本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作，必能得出準確的實驗結果，可提供免費技術咨詢服務！

公司“質量是企業是生命之源”，選購優勢如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿，細胞培養上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標齊全：生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質金屬蛋白酶等等
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樣本實驗前準備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（2）血漿：
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細胞培養上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。
（5）培養細胞
檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（6）組織標本
切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
雙硫腙有效期: 3年以上級別: AR溶解性: 10mg/ml CHcl3來源: 合成

Ammonium  碳氫銨有效期: 3年級別: AR溶解性: 80mg/mL War 別名: 重碳銨;阿莫尼亞

右旋糖酐10000有效期: 2年溶解性: 50 mg/mlWar英文名稱: Dextran 10000: 9004-54-0

鹽普魯卡因有效期: 2年級別: BR溶解性: 100mg/ml in War來源: 合成

對硝基-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷有效期: 3年溶解性: 5 mg/mlWar英文名稱: PNP-Nag: 3459-18-5

亮藍有效期: 3年溶解性: 1 mg/mL in war別名: 食用色素亮藍;性藍9;罌紅二鈉鹽;雙[4-（N-乙基-N-3-磺甲基）氨基基]-2-磺甲基二鈉鹽;食品藍1;羊毛罌紅A英文名稱: Erioglaucine disodium salt

草銨一水別名: 乙二銨;乙二二銨鹽;一水草銨英文名稱: Ammonium oxala monohydra: 6009-70-7分子式: (NH4)2C2O4·H2O

雙[三（羥甲基）氨基丙烷]有效期: 5年級別:  Reagent Grade溶解性: 100mg/mL in War別名: 1,3-二[三(羥甲基)甲氨基]丙烷;BIS-TRIS丙烷;1,3-雙[(三羥甲基)甲基氨基]丙烷
DBH人多巴胺-β羥化酶ELISA試劑盒實驗原理ZNF268  鋅指脂蛋白-1c抗體磷化蛋白激酶B抗體2-(4-溴苯基)苯并咪唑Mouse HPA (Heparanase) ELISA Kit

ZNF268  鋅指脂蛋白抗體磷化鈉ATP酶蛋白a1抗體1-丁基-3-甲基咪唑氫鹽Mouse ALB (Albumin) ELISA Kit

ZNF300  鋅指蛋白300抗體磷化內收蛋白a1抗體1-丁基-3-甲基咪唑氫鹽Mouse HC II (Heparin Cofactor II) ELISA Kit

ZNF307  鋅指蛋白307抗體磷化腺苷單磷活化蛋白激酶α1抗體4-溴丁Mouse HB-EGF (Heparin-binding Epidermal Growth Factor-like Growth Factor) ELISA Kit

ZNF474/ZFP106  鋅指蛋白474抗體磷化腺苷單磷活化蛋白激酶α2抗體4-溴丁Mouse LIPC (Lipase, Hepatic) ELISA Kit

ZO-1  胞質緊密粘連蛋白1抗體性神經酰胺酶1抗體(S)-N-Boc-2-甲Mouse HGF (Hepatocyte Growth Factor) ELISA Kit

ZW10 peptide  著絲粒蛋白抗體粘附調節分子1抗體(S)-N-Boc-2-甲Mouse HNF1a (Hepatocyte Nuclear Factor 1 Alpha) ELISA Kit  

Zyxin/ESP 2  斑聯蛋白抗體氣味結合蛋白抗體(S)-N-Boc-2-甲Mouse HNF1b (Hepatocyte Nuclear Factor 1 Beta) ELISA Kit  
操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設3個平行孔；設兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。 
（2）酶標板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內反應液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標板置37℃培養箱的濕盒內，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標板置37℃培養箱的濕盒內，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數據處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準