MP-Ab人肺炎支原體抗體ELISA試劑盒實驗原理 返回列表頁

ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術要求，在檢測過程中除正常反應外，有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有：
①標本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作，必能得出準確的實驗結果，可提供免費技術咨詢服務！

公司“質量是企業是生命之源”，選購優勢如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿，細胞培養上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標齊全：生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質金屬蛋白酶等等
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樣本實驗前準備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（2）血漿：
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細胞培養上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。
（5）培養細胞
檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（6）組織標本
切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
Verticillium│dahliae Kleb. 大麗輪枝霉Verticillium│dahliae Kleb.分離基物:根系斜面培養物安全等級:1模式菌株:no14生長條件:25-27存儲條件:定期移植法 純度：97%

Xylaria│aemulans Starbäck 亞炭角菌Xylaria│aemulans Starbäck分離基物:腐木斜面培養物安全等級:1模式菌株:no14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度：98%

Alrnaria macrospora Zimm. 大孢鏈格孢Alrnaria macrospora Zimm.分離基物:棉花病葉。寄主名稱：棉花。致病對象：植物。采集地：湖北荊州斜面培養物安全等級:1模式菌株:no綜合PDA：馬鈴薯煮汁1000mL，磷二氫鉀 3g，鎂 1.5g，葡萄糖 20g，維生素B1 10mg，瓊脂 20g，pH自然。馬鈴薯煮液：200g馬鈴薯，去皮，切塊，放入蒸餾中煮沸30min，取濾液定容至1000mL,備用。121℃，15min。生長條件:28℃，好氧存儲條件:定期移植法 純度：98%

Alrnaria longipes (Ellis & Everh.) E.W. Mason 長柄鏈格孢（斜面）Alrnaria longipes (Ellis & Everh.) E.W. Mason分離基物:油松斜面培養物安全等級:1模式菌株:no研究；教學綜合PDA：馬鈴薯煮汁1000mL，磷二氫鉀 3g，鎂 1.5g，葡萄糖 20g，維生素B1 10mg，瓊脂 20g，pH自然。馬鈴薯煮液：200g馬鈴薯，去皮，切塊，放入蒸餾中煮沸30min，取濾液定容至1000mL,備用。121℃，15min。生長條件:25℃，好氧生長特性在TWA+W培養基:上菌落灰褐色，輪紋狀展開，氣生菌絲短，產孢量大。分生孢子梗中度黃褐色至褐色，頂端色淺，單生或簇生，屈膝狀彎曲，多分支。分生孢子淺至中度黃褐色，橢圓形，一般直，光滑，具3個假隔膜，21.5～28.5 × 7.5～11.5μm；臍部略突出，色暗。存儲條件:定期移植法 純度：99%

Lysurus│mokusin (L.) Fr. 棱柱散尾菌Lysurus│mokusin (L.) Fr.分離基物:子實體斜面培養物模式菌株:no藥用14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度：99%

Bacillus│natto 納豆芽孢桿菌Bacillus│natto斜面培養物安全等級:1模式菌株:no飼料、食品6生長條件:37存儲條件:定期移植法 純度：99%

Phytophthora│cactorum (Lebert & Cohn) J. Schröt. 惡疫霉Phytophthora│cactorum (Lebert & Cohn) J. Schröt.分離基物:梨果實斜面培養物安全等級:1模式菌株:no14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度：97%

Coniothyrium│fuscidulum Sacc. 桑殼圓孢菌Coniothyrium│fuscidulum Sacc.分離基物:黃楊葉片斜面培養物安全等級:1模式菌株:no植物病原物；用于該類群菌的系統學研究，尤其是與膠盤孢、粘盤孢、盤長孢、盤多毛孢等的系統學研究14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度：98%
MP-Ab人肺炎支原體抗體ELISA試劑盒實驗原理CCR7/CD197  表面趨化因子受體7抗體7-甲氧基-4'-羥基異黃1,6-二苯基-1,3,5-己三烯Human CP (Ceruloplasmin) ELISA Kit

CXCL10/Gamma-IP-10  CXCL10趨化因子10/干擾素誘導蛋白10抗體二甲磺阿米三1,6-二苯基-1,3,5-己三烯Human α-CTx (Alpha Crosslaps) ELISA Kit

CXCR7/RDC1  表面趨化因子受體7抗體蘿巴新2-甲基煙乙酯Human CD42 (Cluster of Differentiation 42) ELISA Kit

CCR-8  表面趨化因子受體8抗體枸櫞鋅2-甲基煙乙酯Human HLA-B27 (Human Leukocyte Antigen B27) ELISA Kit

CCL25/CCR-9  表面趨化因子受體9抗體卡莫2-甲基煙乙酯Human FGFR2 (Fibroblast Growth Factor Receptor 2) ELISA Kit

CCL28/MEC  粘膜相關上皮趨化因子28抗體奧沙普秦3,5-二甲氧基苯甲酰胺Human IFABP/FABP2 (Intestinal Fatty Acid Binding Protein) ELISA Kit

CCR-10  表面趨化因子受體10抗體尼可占替諾（煙占替諾）3,5-二甲氧基苯甲酰胺Human LP-a (Lipoprotein a) ELISA Kit

CCRK  周期相關激酶抗體鹽帕羅西汀2-(2-乙基)二二乙酯Human MBP (Myelin Basic Protein) ELISA Kit
操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設3個平行孔；設兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。 
（2）酶標板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內反應液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標板置37℃培養箱的濕盒內，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標板置37℃培養箱的濕盒內，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數據處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準