小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞 返回列表頁

產(chǎn)品屬于：

產(chǎn)品名稱：小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞    

產(chǎn)品英文：HT22

貨號：FS-01X9663

細(xì)胞培養(yǎng)條件：DMEM+10%FBS+1%P/S

生長狀態(tài)：貼壁生長

產(chǎn)品規(guī)格：1×106

單位：T25/瓶

是否提供細(xì)胞STR鑒定：不提供STR鑒定報告

保存培養(yǎng)溫度（℃）37

運輸溫度（℃）：常溫   

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項：

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

G Fc段受體Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)ELISA試劑盒 Human ReceptorⅠfor the Fc region of immunoglobulin G,FcγRⅠ ELISA Kit

人粒細(xì)胞趨化蛋白-2(GCP-2/CXCL6)ELISA試劑盒Human granulocyte chemotactic protein-2,GCP-2 ELISA Kit

人ω干擾(IFN-ω/IFNB)ELISA試劑盒Human Interferon ω,IFN-ω ELISA Kit

人糖基化依賴的細(xì)胞黏附分子(GlyCAM-1)ELISA試劑盒 Human glycosylation-dependent cell adhesion molecule-1,GlyCAM-1 ELISA Kit

人干擾調(diào)節(jié)因子(IRF)ELISA試劑盒 Human interferon Regulatory Factor,IRF ELISA Kit

人淋巴毒β(LTB)ELISA試劑盒 Human lymphotoxinβ,LTB ELISA Kit

人淋巴毒α(LTA)ELISA試劑盒 Human lymphotoxinα,LTA ELISA Kit

人CC趨化因子受體1(CCR1)ELISA試劑盒Human CC-chemokine receptor 1,CCR1 ELISA Kit

人CX3C趨化因子受體1(CX3CR1)ELISA試劑盒Human CX3C-chemokine receptor 1,CX3CR1 ELISA Kit

人肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)ELISA試劑盒 Human pulmonary activation regulated chemokine,PARC ELISA Kit

人黏膜地址細(xì)胞黏附分子(MAdCAM-1)ELISA試劑盒Human mucosal addressin cell adhesion molecule-1,MAdCAM-1 ELISA Kit

人可溶性CD38(sCD38)ELISA試劑盒Human Soluble Cluster of differentiation 38,sCD38 ELISA Kit

人可溶性CD21(CR2/sCD21)ELISA試劑盒 Human Soluble Cluster of differentiation 21,sCD21 ELISA Kit

人可溶性瘦受體(sLR)ELISA試劑盒Human Leptin Soluble Receptor,sLR ELISA Kit

人Toll樣受體9(TLR-9/CD289)ELISA試劑盒Human Toll-like receptor 9,TLR-9 ELISA Kit

人單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒 Human monocyte chemotactic protein 4,MCP-4 ELISA Kit

人N鈣黏蛋白/神經(jīng)鈣黏蛋白(N-Cad)ELISA試劑盒 Human Neural-Cadherin, N-Cad ELISA Kit

人肝結(jié)合性表皮生長因子(HB-EGF)ELISA試劑盒Human heparin-binding epidermal growth factor-like growth factor,HB-EGF ELISA Kit

人紅細(xì)胞刺激因子(ESF)ELISA試劑盒 Human erythropoiesis stimulating factor,ESF ELISA Kit
小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞Ractopamine /PAYLEAN (1B12)  小鼠抗萊克多巴單克隆抗體 0.2ml

Cellulase  纖維 1ml

Pectinesterase  果膠抗體 1ml

DLK1/Delta/DLL1 (C-terminus)  穿膜蛋白DLK1抗體（C端） 0.1ml

ADD1/alpha Adducin  內(nèi)收蛋白a1抗體 0.2ml

Gibberellins  牛磺/β-基乙磺抗體 0.1ml

EGF  表皮生長因子抗體 0.1ml

EGF  小鼠抗表皮生長因子抗體 0.1ml