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    當前位置:上海撫生實業有限公司>>科研細胞>>原代細胞>> 毛囊角質細胞

    毛囊角質細胞

    參  考  價面議
    具體成交價以合同協議為準

    產品型號

    品       牌其他品牌

    廠商性質經銷商

    所  在  地上海市

    更新時間:2022-04-18 13:53:57瀏覽次數:157次

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    產地 國產 加工定制
    適用領域 科研 貨號 FS-01X9869
    毛囊角質細胞公司正在出售的產品:主動脈平滑肌細胞規格:5 × 105次方(1ml)
    單核細胞規格:5 × 105次方(1ml)
    大隱靜脈平滑肌細胞規格:5 × 105次方(1ml)

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    產品屬于:

    產品名稱:毛囊角質細胞    

    產品規格:5×105

    貨號:FS-01X9869

    產品類型:原代細胞

    單位:T25/瓶

    提供細胞鑒定:提供免疫熒光鑒定報告

    保存培養溫度(℃):37

    運輸溫度(℃):常溫

    細胞培養的優點:

    1.研究的對象是活細胞

    在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態、結構、生命活動等。

    2.研究條件可以人為控制

    pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

    3.研究的樣本可以達到比較均一性

    通過細胞培養一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

    4.研究內容便于觀察、檢測和記錄

    采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。

    細胞培養操作規程:

    一.培養基及培養凍存條件準備:

    1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。

    2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。

    3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。

    二.細胞處理:

    1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

    2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

    對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

    方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

    注意事項:

    1. 接收到細胞,肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。

    2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。

    3.嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。

    4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。

    5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。

    6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。

    7.換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2培養。

    實驗報告:

    一、分離與培養:

    1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

    2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

    3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

    4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

    5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

    二、免疫熒光鑒定:

    1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

    2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

    3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

    4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

    5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

    6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

    豬巨噬細胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine macrophage inflammatory protein 1α,MIP-1α ELISA Kit規格:96T/48T

    豬角化細胞生長因子(KGF)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine Keratinocyte Growth Factor,KGF ELISA Kit規格:96T/48T

    豬基質金屬蛋白抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine tissue inhibitors of metalloproteinase 1,TIMP-1 ELISA Kit規格:96T/48T

    豬基質金屬蛋白9(MMP-9)ELISA試劑盒 英文名稱:Porcine matrix metalloproteinase 9,MMP-9 ELISA Kit規格:96T/48T

    豬睪(T)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine Testoterone,T ELISA Kit規格:96T/48T

    豬肝細胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine hepatocyte growth factor,HGF ELISA Kit規格:96T/48T

    γ干擾(IFN-γ)ELISA試劑盒 英文名稱:Porcine Interferon γ ,IFN-γ ELISA Kit規格:96T/48T

    豬端粒(TE)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine telomerase,TE ELISA Kit規格:96T/48T

    豬促生長釋放(GHRH)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine growth hormone releasing hormone,GHRH ELISA Kit規格:96T/48T

    豬促卵泡(FSH)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine Follicle-stimulating hormone,FSH ELISA Kit規格:96T/48T

    Ⅰ型前膠原羧基端(PⅠCP)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine Carboxyterminal propeptide of type Ⅰ procollagen,PⅠCP ELISA Kit規格:96T/48T

    豬表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine Epithelial growth factor,EGF ELISA Kit規格:96T/48T

    豬白介8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒 英文名稱:Porcine interleukin 8,IL-8 ELISA Kit規格:96T/48T

    豬白介6(IL-6)ELISA試劑盒 英文名稱:Porcine Interleukin 6,IL-6 ELISA Kit規格:96T/48T

    豬白介4(IL-4)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine interleukin 4,IL-4 ELISA Kit規格:96T/48T

    豬白介3(IL-3)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine interleukin 3,IL-3 ELISA Kit規格:96T/48T

    豬白介2(IL-2)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine interleukin 2,IL-2 ELISA Kit規格:96T/48T

    豬白介1β (IL-1β)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine Interleukin 1β,IL-1β ELISA Kit規格:96T/48T
    毛囊角質細胞MEGF5/Slit3  復合型表皮生長因子樣結構域蛋白5抗體規格: 0.2ml

    TRIM29/ATDC  共濟失調毛細血管擴張癥D相關蛋白抗體規格: 0.2ml

    UBE2V1/UEV1A  泛結合E2變異體1抗體規格: 0.2ml

    VHLH/Von Hippel Lindau  腦視網膜血管瘤G7蛋白抗體(逢希伯-林道氏病)規格: 0.2ml

    Cyclin B3  周期B3抗體規格: 0.2ml

    CCNDBP1/GCIP  周期D結合蛋白1抗體規格: 0.2ml

    AFF4  淋巴細胞相關AF4樣蛋白抗體規格: 0.2ml

    Cyclin K/CCNK  周期K抗體規格: 0.2ml

     


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