国产精品一区二区在线观看不卡,国内免费精品永久在线视频,久久免费视频一区

貨號	FS-X10853

培養(yǎng)操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

中文名稱：ROCK抑制劑(Thiazovivin)

英文名稱：Thiazovivin

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

貨號：FS-X10853

產(chǎn)品介紹:

Thiazovivin(Tzv)是新型的ROCK抑制劑，IC50為0.5μM，能促進hESC的存活。

注：本品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！

號：1226056-71-8

純度：99.32%

分子量：311.36

儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

釀酒酵母小鼠干擾誘導(dǎo)蛋白Anti-POTEA Antibody人C反應(yīng)蛋白(CRP)

淺玫瑰鏈霉菌大鼠分泌型免疫球蛋白AAnti-POTEB Antibody人C反應(yīng)蛋白(CRP)

干草鞘單胞菌人胃癌標(biāo)志物Anti-POTEG Antibody人固(ALD)

金黑小單孢菌小鼠上皮中性粒活化肽78Anti-POU2F1 Antibody人固(ALD)

大鼠血紅氧合2Anti-POTEH Antibody人肌紅蛋白(MYO/MB)

曲霉小鼠氧化低密度脂蛋白抗體Anti-PPARD Antibody人肌紅蛋白(MYO/MB)

*紅城紅球菌人鱗狀上皮癌抗原2Anti-PPARA Antibody人心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)

產(chǎn)二鏈霉菌大鼠骨膠原交聯(lián)Anti-PPFIBP1 Antibody人心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)

鏈格孢蘋果專化型小鼠抗平滑肌抗體Anti-PPHLN1 Antibody人血管生成受體/含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪激1(Tie1)

玉大斑病菌大鼠Ⅰ型前膠原C末端肽Anti-PPHLN1 Antibody人血管生成受體/含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪激1(Tie1)

尖孢鐮孢人胰腺癌標(biāo)志物CA242Anti-PPIF Antibody人血管生成2(ANG-2)

人胃腸癌標(biāo)志物CA199Anti-PPM1K Antibody人血管生成2(ANG-2)

黑曲霉小鼠胚胎干系MESPU30Anti-PPM1L Antibody人血管生成1(ANG-1)

白僵菌大鼠脫氧吡啶/脫氧吡啶啉Anti-PPM1L Antibody人血管生成1(ANG-1)

擬柱形德克斯酵母大鼠吡啶交聯(lián)物Anti-PPM1K Antibody人血管生長(ANG)

死海鹽盒菌小鼠核因子κB亞基p65親和肽Anti-PPP1R11 Antibody人血管生長(ANG)

轉(zhuǎn)錄因子DP3抗體相關(guān)抗原661色二孢人結(jié)腸癌氟耐藥株

早期未分化視網(wǎng)膜及晶狀體蛋白EURL抗體長根小奧德蘑鱗柄變種人結(jié)腸癌耐氟細(xì)胞株

睪丸特異激底物蛋白抗體粗柄側(cè)耳(俗名：北風(fēng)菌)鼠多巴胺能神經(jīng)元細(xì)胞

MED17抗體青霉卵巢透明細(xì)胞癌
ROCK抑制劑(Thiazovivin)海水球艾格瓊脂瘟病IgA抗體

孢籃狀 TM培養(yǎng)基瘟病IgG抗體

白黃阮繼生氏 DL-泛瘟病IgM抗體

彎孢 2-環(huán)己酮甲乙酯瘟抗體

異常威克漢姆酵母假單胞分離肉湯間粘附分子1

糙卷霉肌測定培養(yǎng)基纖連蛋白

類食品乳桿性肉湯性結(jié)合球蛋白

魯毛霉煙測定培養(yǎng)基雄烯二酮

淺黃曲霉維生B12測定用培養(yǎng)基雄烯酮

香菇測定培養(yǎng)基血管緊張1-7

豇豆慢生根瘤泛測定培養(yǎng)基血管緊張??

薛瓦酵母游離生物測定培養(yǎng)基血管內(nèi)皮生長因子

大腸埃希 2-血管內(nèi)皮粘附分子1

卵孢木霉二環(huán)己基化膦血管生成1

紅緣層孔氣單胞培養(yǎng)基基礎(chǔ)血管生成2
操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)