PP人胃蛋白酶ELISA試劑盒實驗原理 返回列表頁

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公司“質量是企業是生命之源”，選購優勢如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿，細胞培養上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標齊全：生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質金屬蛋白酶等等

ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術要求，在檢測過程中除正常反應外，有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有：
①標本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作，必能得出準確的實驗結果，可提供免費技術咨詢服務！
操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設3個平行孔；設兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。 
（2）酶標板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內反應液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標板置37℃培養箱的濕盒內，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標板置37℃培養箱的濕盒內，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數據處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
樣本實驗前準備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（2）血漿：
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細胞培養上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。
（5）培養細胞
檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（6）組織標本
切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
QAE-葡聚糖凝膠A-25有效期: 1年英文名稱: Sephadex A-25儲存條件: RT單位: 瓶

聯單乙別名: 聯單乙;4-乙?；?4-基乙,4-聯乙，聯乙英文名稱: 4-Acetyl-biphenyl: 92-91-1分子式: C9H10O3

溴化鋰,一水有效期: 2年英文名稱: Lithium bromide monohydra: 23303-71-1儲存條件: RT

CM-葡聚糖凝膠C-50有效期: 1年英文名稱: Sephadex C-50儲存條件: RT單位: 瓶

大孔吸附樹脂  D-315單位: 瓶其吐溫85有效期: 1年級別: CP: 9005-70-3儲存條件: RT

磺胺吡嗪: 102-65-8單位: 瓶其它:

PP人胃蛋白酶ELISA試劑盒實驗原理Caspase-13/FITC  熒光素標記半胱胺蛋白酶蛋白-13抗體IgGalpha 1腎上腺素能受體A抗體四氮唑Mouse TPA (Tissue Polypeptide Antigen) ELISA Kit

Phospho-Caspase-9 (Thr125) /FITC  熒光素標記兔抗人、大、鼠磷化白介素1-β轉化酶樣凋亡蛋白酶6抗體IgG血管緊張素Ⅱ-1型受體抗體2--6-甲基-3-吡甲Mouse t-PA (Tissue-type Plasiminogen Actilyse) ELISA Kit

 Alpha-Catenin/ Alpha-cats /FITC  熒光素標記α-連環蛋白抗體（α-α鏈接素）IgG活化轉錄因子3抗體2--6-甲基-3-吡甲Mouse TLR9 (Toll-like Receptor 9) ELISA Kit

 Beta-catenin/ Beta-cats /FITC  熒光素標記 β-連環蛋白抗體IgG血管緊縮素樣蛋白1抗體2--6-甲基-3-吡甲Mouse FBXO32 (F-Box Protein 32)  ELISA kit

Phospho- Beta-Catenin (Ser33/37) /FITC  熒光素標記兔抗人、大、鼠磷化β 連環素蛋白抗體IgG自噬相關蛋白7抗體2--5-甲Mouse CD8 (Cluster of Differentiation 8) ELISA Kit

p- Beta catenin/FITC  熒光素標記磷化β-連環蛋白抗體IgG炭疽素受體2抗體2-甲Mouse MuRF1 (muscle-specific RING-finger protein 1) ELISA kit

Phospho- Beta-Catenin (Ser45)/FITC  熒光素標記兔抗人、大、鼠磷化β 連環素蛋白抗體IgG自噬相關蛋白4C抗體7-甲基-1二氧雜環庚烷-3-Mouse Toxoplasma IgA antibody ELISA Kit

Phospho- Beta-Catenin (Ser552) /FITC  熒光素標記兔抗人、大、鼠磷化β 連環素蛋白抗體IgG自噬蛋白5/凋亡的特異性蛋白抗體7--1,5-并二氧雜環庚烷-3-Mouse Toxoplasma IgD antibody ELISA Kit