當前位置:上海撫生實業有限公司>>細胞生物學試劑>>抑制劑激活劑>> BET蛋白抑制劑(GSK1324726A)
貨號 | FS-X10847 |
---|
英文名稱:GSK1324726A
產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
貨號:FS-X10847
產品介紹:
GSK1324726A是一種有效的選擇性BET蛋白抑制劑,高親和力結合到BRD2(IC50=41nM),BRD3(IC50=31nM)和BRD4(IC50=22nM)。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! 號:1300031-52-0 別名:I-BET726 純度:98.21% 分子量:434.91 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
美梅奇酵母大鼠補體片斷5aAnti-Phospho-Rabphilin 3A (Ser234) Antibody人腎上腺皮質抗體(ACA)
剛第弓形蟲小鼠前列腺性磷Anti-Phospho-S6 Kinase 1 (Thr449) Antibody人腎上腺皮質抗體(ACA)
黑曲霉小鼠前列腺特異性抗原Anti-Phospho-Synapsin I (Ser9) Antibody人抗腎小球基底膜抗體(GBM)
大鼠補體片斷3aAnti-Phospho-Synapsin I (Ser62,67) Antibody人抗腎小球基底膜抗體(GBM)
褶皺曲霉人小扁豆結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體3Anti-Phospho-Synaptotagmin (Ser309) Antibody人β2微球蛋白(BMG/β2-MG)
產灰色鏈霉菌人小扁豆結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體2Anti-Phospho-Synapsin I (Ser603) Antibody人β2微球蛋白(BMG/β2-MG)
枯草芽孢桿菌大鼠卵泡抑Anti-Phospho-Tyrosine Hydroxylase (Ser31) Antibody人膜聯蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)
檸條根瘤菌小鼠卵巢癌標志物CA125Anti-Phospho-Synaptotagmin (Thr202) Antibody人膜聯蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)
檸檬兩面神菌大鼠組織蛋白去乙酰化Anti-Phospho-Tyrosine Hydroxylase (Ser40) Antibody人抗腎小管基底膜抗體(TBM)
粉紅聚端孢霉小鼠癌標志物-CA153Anti-PIAS3 Antibody人抗腎小管基底膜抗體(TBM)
松杉靈芝人小扁豆結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體1Anti-PHYKPL Antibody人apelin 13(AP13)
雙孢蘑菇人黑色瘤標記物Anti-PIGH Antibody人apelin 13(AP13)
雙孢蘑菇小鼠胃腸癌標志物CA199Anti-PIGY Antibody人Apelin 36(AP36)
榛針孢酵母大鼠E選擇Anti-PIK3R5 Antibody人Apelin 36(AP36)
平菇—465大鼠甲基化Anti-PIN1 Antibody人肌鈣蛋白T(Tn-T)
玫瑰單胞菌小鼠血紅氧合1Anti-PIK3C2G Antibody人肌鈣蛋白T(Tn-T)
轉導β1X連鎖受體蛋白1抗體葡萄酒色被孢霉人腦星形膠質母細胞瘤細胞
甲狀腺受體相關蛋白220抗體粉樹孢人卵巢畸胎瘤細胞
腫瘤血管內皮標記相關蛋白質7抗體炭角菌F-12K*培養基:
TBC結構域TBCD4蛋白抗體牛肝菌6-4小鼠逆轉錄病毒包裝細胞
BET蛋白抑制劑(GSK1324726A)硫氧化博斯氏 LBS瓊脂環磷鳥
糙皮側耳 MRS瓊脂環磷腺
兩形頭曲霉 ITC肉湯環氧合2
秦氏蜜環 環戊硫活化蛋白C
根瘤 BETA-SSA瓊脂活性氧簇
產氣莢膜梭 C型 LIM培養基肌球蛋白輕鏈磷
威爾氏李斯特 煌綠黃嘧啶瓊脂肌激
大腸埃希 改良MSRV培養基肌激同工MB
枯草芽孢桿 SCCRAM肉湯基質金屬蛋白1
香菇 (1S,2S)-N-(對甲苯磺酰)-1,2-二苯基乙二基質金屬蛋白13
三孢布拉霉 BPL瓊脂基質金屬蛋白9
白地霉 BPLS瓊脂敏感性脂肪
副豬嗜血桿 改良BPLS瓊脂己糖激
褐紅小孔 XLT4瓊脂甲狀腺
蘇云金芽胞桿勵木亞種 M-肉湯堿性磷
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業自行提供,信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業負責,儀表網對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規避購買風險,建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。